微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2007年
4期
15-18
,共4页
何礼洋%贾艳%雷连成%杨洋%韩文瑜
何禮洋%賈豔%雷連成%楊洋%韓文瑜
하례양%가염%뢰련성%양양%한문유
肺炎克雷伯菌%Ⅲ型菌毛%热洗脱法%鉴定
肺炎剋雷伯菌%Ⅲ型菌毛%熱洗脫法%鑒定
폐염극뢰백균%Ⅲ형균모%열세탈법%감정
将表达Ⅲ型菌毛的肺炎克雷伯菌临床分离株Kp7在改良Minka液体培养基上传代培养,使之充分菌毛化,大量收集菌毛生长良好的细菌,利用热洗脱法分离提取菌毛,经硫酸铵沉淀、透析后进行蔗糖密度梯度离心,收集20%～30%梯度中的蛋白带,经SDS-PAGE电泳可见1条大小在20.5 ku的蛋白条带.提纯菌毛保留了甘露糖抵抗血凝特性,并与用Kp7全菌免疫家兔制备的高免血清在Western blot中反应呈阳性,证实其条带为Ⅲ型菌毛主要结构蛋白.
將錶達Ⅲ型菌毛的肺炎剋雷伯菌臨床分離株Kp7在改良Minka液體培養基上傳代培養,使之充分菌毛化,大量收集菌毛生長良好的細菌,利用熱洗脫法分離提取菌毛,經硫痠銨沉澱、透析後進行蔗糖密度梯度離心,收集20%～30%梯度中的蛋白帶,經SDS-PAGE電泳可見1條大小在20.5 ku的蛋白條帶.提純菌毛保留瞭甘露糖牴抗血凝特性,併與用Kp7全菌免疫傢兔製備的高免血清在Western blot中反應呈暘性,證實其條帶為Ⅲ型菌毛主要結構蛋白.
장표체Ⅲ형균모적폐염극뢰백균림상분리주Kp7재개량Minka액체배양기상전대배양,사지충분균모화,대량수집균모생장량호적세균,이용열세탈법분리제취균모,경류산안침정、투석후진행자당밀도제도리심,수집20%～30%제도중적단백대,경SDS-PAGE전영가견1조대소재20.5 ku적단백조대.제순균모보류료감로당저항혈응특성,병여용Kp7전균면역가토제비적고면혈청재Western blot중반응정양성,증실기조대위Ⅲ형균모주요결구단백.
