中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2007年
4期
557-562
,共6页
谢岷%杨于嘉%刘沉涛%王庆红%王霞%余小河
謝岷%楊于嘉%劉沉濤%王慶紅%王霞%餘小河
사민%양우가%류침도%왕경홍%왕하%여소하
上清液%骨髓基质细胞%细胞分化%缺氧%缺血%脑%大鼠
上清液%骨髓基質細胞%細胞分化%缺氧%缺血%腦%大鼠
상청액%골수기질세포%세포분화%결양%결혈%뇌%대서
目的:观察缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠不同时间点脑组织上清液对骨髓基质细胞(BMSCs)向神经细胞分化的影响.方法:7日龄新生SD大鼠结扎左颈总动脉制作HIBD 模型(n=15),另设 15只正常同日龄新生大鼠.两组分别在 HIBD后24h(8日龄)、72h(10日龄)及7d(14日龄)时处死(n=5).分别制备左、右脑组织上清液.将培养3～5代的SD大鼠BMSCs接种于预先置有盖玻片24孔板中,正常培养至细胞达到60%～70%融合后,分别加入上述时间点的脑组织上清液,另正常换液未加上清液组为未干预组.培养3d后行神经元特异性烯醇酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、少突胶质细胞前体细胞标记O4 的免疫荧光检测,计算阳性率.结果:未干预各组细胞仅有少量NSE,GFAP及O4的表达,正常大鼠各时间点左、右脑上清液共培养各组细胞NSE,GFAP及O4阳性率较未干预组增加(均P＜0.01),但左、右两侧比较差异无统计学意义(P＞0.05).HIBD后24h组、72h组左脑(损伤侧)上清液共培养组细胞NSE,O4的阳性率明显增加,分别与同时间点右侧及正常组同一时间点的左、右侧比较,差异有统计学意义(分别P＜0.05,P＜0.01),HIBD后7d左、右脑上清液共培养组细胞NSE,GFAP及O4的阳性率相近,分别与正常组同一时间点比较差异无统计学意义(P＞0.05).HIBD后24h组左脑上清液共培养组细胞NSE,O4的阳性率较HIBD后72h组及7d组左脑上清液共培养组细胞NSE,O4的阳性率高,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论:正常鼠、HIBD鼠脑上清液均能诱导BMSCs发生神经分化,以HIBD后24h损伤侧脑上清液对BMSCs的神经分化率最高.
目的:觀察缺氧缺血性腦損傷(HIBD)新生大鼠不同時間點腦組織上清液對骨髓基質細胞(BMSCs)嚮神經細胞分化的影響.方法:7日齡新生SD大鼠結扎左頸總動脈製作HIBD 模型(n=15),另設 15隻正常同日齡新生大鼠.兩組分彆在 HIBD後24h(8日齡)、72h(10日齡)及7d(14日齡)時處死(n=5).分彆製備左、右腦組織上清液.將培養3～5代的SD大鼠BMSCs接種于預先置有蓋玻片24孔闆中,正常培養至細胞達到60%～70%融閤後,分彆加入上述時間點的腦組織上清液,另正常換液未加上清液組為未榦預組.培養3d後行神經元特異性烯醇酶(NSE)、膠質纖維痠性蛋白(GFAP)、少突膠質細胞前體細胞標記O4 的免疫熒光檢測,計算暘性率.結果:未榦預各組細胞僅有少量NSE,GFAP及O4的錶達,正常大鼠各時間點左、右腦上清液共培養各組細胞NSE,GFAP及O4暘性率較未榦預組增加(均P＜0.01),但左、右兩側比較差異無統計學意義(P＞0.05).HIBD後24h組、72h組左腦(損傷側)上清液共培養組細胞NSE,O4的暘性率明顯增加,分彆與同時間點右側及正常組同一時間點的左、右側比較,差異有統計學意義(分彆P＜0.05,P＜0.01),HIBD後7d左、右腦上清液共培養組細胞NSE,GFAP及O4的暘性率相近,分彆與正常組同一時間點比較差異無統計學意義(P＞0.05).HIBD後24h組左腦上清液共培養組細胞NSE,O4的暘性率較HIBD後72h組及7d組左腦上清液共培養組細胞NSE,O4的暘性率高,差異有統計學意義(均P＜0.01).結論:正常鼠、HIBD鼠腦上清液均能誘導BMSCs髮生神經分化,以HIBD後24h損傷側腦上清液對BMSCs的神經分化率最高.
목적:관찰결양결혈성뇌손상(HIBD)신생대서불동시간점뇌조직상청액대골수기질세포(BMSCs)향신경세포분화적영향.방법:7일령신생SD대서결찰좌경총동맥제작HIBD 모형(n=15),령설 15지정상동일령신생대서.량조분별재 HIBD후24h(8일령)、72h(10일령)급7d(14일령)시처사(n=5).분별제비좌、우뇌조직상청액.장배양3～5대적SD대서BMSCs접충우예선치유개파편24공판중,정상배양지세포체도60%～70%융합후,분별가입상술시간점적뇌조직상청액,령정상환액미가상청액조위미간예조.배양3d후행신경원특이성희순매(NSE)、효질섬유산성단백(GFAP)、소돌효질세포전체세포표기O4 적면역형광검측,계산양성솔.결과:미간예각조세포부유소량NSE,GFAP급O4적표체,정상대서각시간점좌、우뇌상청액공배양각조세포NSE,GFAP급O4양성솔교미간예조증가(균P＜0.01),단좌、우량측비교차이무통계학의의(P＞0.05).HIBD후24h조、72h조좌뇌(손상측)상청액공배양조세포NSE,O4적양성솔명현증가,분별여동시간점우측급정상조동일시간점적좌、우측비교,차이유통계학의의(분별P＜0.05,P＜0.01),HIBD후7d좌、우뇌상청액공배양조세포NSE,GFAP급O4적양성솔상근,분별여정상조동일시간점비교차이무통계학의의(P＞0.05).HIBD후24h조좌뇌상청액공배양조세포NSE,O4적양성솔교HIBD후72h조급7d조좌뇌상청액공배양조세포NSE,O4적양성솔고,차이유통계학의의(균P＜0.01).결론:정상서、HIBD서뇌상청액균능유도BMSCs발생신경분화,이HIBD후24h손상측뇌상청액대BMSCs적신경분화솔최고.
