溶氧反馈-补料分批技术高密度培养基因重组MAGE1/HSP70/MAGE3工程菌
용양반궤-보료분비기술고밀도배양기인중조MAGE1/HSP70/MAGE3공정균
Preparation of gene recombinant MAGE1/HSP70/MAGE3 by high cell density culture of E.coli.with DO fed-back control of nutrient feeding
  • 万方数据
    第三军医大学学报 제삼군의대학학보
    ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
    2007年 16期 1576-1579 ,共4页

    胡沛臻%温江田%路凡%王孝功%李侠%司少艳%葛伟%黄杨%张秀敏%隋延仿

    호패진%온강전%로범%왕효공%리협%사소염%갈위%황양%장수민%수연방

    黑色素瘤抗原%重组%大肠杆菌%发酵 黑色素瘤抗原%重組%大腸桿菌%髮酵
    흑색소류항원%중조%대장간균%발효
    目的 建立人黑色素瘤抗原MAGE1/HSP70/MAGE3融合蛋白基因重组工程菌E.coli.BL21/pET-MHM的高密度发酵工艺.方法 以摇瓶发酵结果为基础,扩大至NBS Bioflo Ⅳ 20 L发酵罐发酵,利用溶氧反馈-补料分批培养技术,对影响工程菌生长及目的蛋白表达的因素如发酵培养基、活化时间、诱导浓度及时间、pH值及分批补加营养物质等进行优化.结果 保持培养过程中40%的溶解氧,采用半合成培养基、活化至对数生长期时0.2 mmol/L IPTG诱导5 h以及以甘油为碳源连续流加补料的条件发酵,连续3批重复发酵,最终菌密度D(600)均达45～50时,菌体量可提高至70 g/L以上,目的蛋白的表达量占菌体蛋白总量的38%以上.结论 确定了周期短、产率高且稳定可靠的发酵工艺.
    목적 건립인흑색소류항원MAGE1/HSP70/MAGE3융합단백기인중조공정균E.coli.BL21/pET-MHM적고밀도발효공예.방법 이요병발효결과위기출,확대지NBS Bioflo Ⅳ 20 L발효관발효,이용용양반궤-보료분비배양기술,대영향공정균생장급목적단백표체적인소여발효배양기、활화시간、유도농도급시간、pH치급분비보가영양물질등진행우화.결과 보지배양과정중40%적용해양,채용반합성배양기、활화지대수생장기시0.2 mmol/L IPTG유도5 h이급이감유위탄원련속류가보료적조건발효,련속3비중복발효,최종균밀도D(600)균체45～50시,균체량가제고지70 g/L이상,목적단백적표체량점균체단백총량적38%이상.결론 학정료주기단、산솔고차은정가고적발효공예.
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