微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2006年
2期
200-204
,共5页
黄玉屏%刘鹏%刘义%沈韫芬%沈萍
黃玉屏%劉鵬%劉義%瀋韞芬%瀋萍
황옥병%류붕%류의%침운분%침평
启动子%微量热技术%β-半乳糖苷酶基因%嗜盐古菌
啟動子%微量熱技術%β-半乳糖苷酶基因%嗜鹽古菌
계동자%미량열기술%β-반유당감매기인%기염고균
将来源于嗜盐古菌染色体DNA的启动子片段RM07或RM13插入到启动子探针载体pYLZ-2的报告基因lacZ之前,通过β-半乳糖苷酶酶活性的检测,进一步确证RM07和RM13片段在大肠杆菌(Escherichia coli)中的启动功能.同时用微量热技术检测了大肠杆菌DH5α及其重组菌株在LB培养基中37℃生长过程的热输出功率.T2(pYLZ-2)、TE07(pYL726)、TE07-2(pYL702)、TE131(pYL131)和TE132(pYL132)菌株的生长速率分别比大肠杆菌DH5α降低了6.5%、11%、41.1%、47.5%和42.7%.当启动子启动了基因表达时,菌株的生长速率显著降低,热力学参数与酶活性检测结果有较好的一致性.微量热结果表明基因的表达比质粒DNA的复制过程需要消耗更多的能量,对细菌的生理代谢有较大改变.微量热技术为检测基因的表达和转录调控提供了新的方法和思路.
將來源于嗜鹽古菌染色體DNA的啟動子片段RM07或RM13插入到啟動子探針載體pYLZ-2的報告基因lacZ之前,通過β-半乳糖苷酶酶活性的檢測,進一步確證RM07和RM13片段在大腸桿菌(Escherichia coli)中的啟動功能.同時用微量熱技術檢測瞭大腸桿菌DH5α及其重組菌株在LB培養基中37℃生長過程的熱輸齣功率.T2(pYLZ-2)、TE07(pYL726)、TE07-2(pYL702)、TE131(pYL131)和TE132(pYL132)菌株的生長速率分彆比大腸桿菌DH5α降低瞭6.5%、11%、41.1%、47.5%和42.7%.噹啟動子啟動瞭基因錶達時,菌株的生長速率顯著降低,熱力學參數與酶活性檢測結果有較好的一緻性.微量熱結果錶明基因的錶達比質粒DNA的複製過程需要消耗更多的能量,對細菌的生理代謝有較大改變.微量熱技術為檢測基因的錶達和轉錄調控提供瞭新的方法和思路.
장래원우기염고균염색체DNA적계동자편단RM07혹RM13삽입도계동자탐침재체pYLZ-2적보고기인lacZ지전,통과β-반유당감매매활성적검측,진일보학증RM07화RM13편단재대장간균(Escherichia coli)중적계동공능.동시용미량열기술검측료대장간균DH5α급기중조균주재LB배양기중37℃생장과정적열수출공솔.T2(pYLZ-2)、TE07(pYL726)、TE07-2(pYL702)、TE131(pYL131)화TE132(pYL132)균주적생장속솔분별비대장간균DH5α강저료6.5%、11%、41.1%、47.5%화42.7%.당계동자계동료기인표체시,균주적생장속솔현저강저,열역학삼수여매활성검측결과유교호적일치성.미량열결과표명기인적표체비질립DNA적복제과정수요소모경다적능량,대세균적생리대사유교대개변.미량열기술위검측기인적표체화전록조공제공료신적방법화사로.