CAJ | 학술논문

目的: 构建适于原核表达的人诱骗受体DcR3基因, 并进行重组蛋白的表达纯化及特异性鉴定.方法: 查得人DcR3 Cdna全序列, 将其分段设计引物, 通过重叠PCR获得DcR3基因.构建Pet-22b(+)/DcR3表达载体, 转化大肠杆菌Rosseta-gami, IPTG诱导表达, Ni柱纯化.采用ELISA进行特异性鉴定.结果: 通过重叠PCR获得了编码正确氨基酸序列的目的基因.目的蛋白以包涵体的形式表达, 表达量占菌体总蛋白的30%以上.纯化后, 蛋白纯度达95%以上.ELISA结果表明所纯化的蛋白可与抗DcR3抗体发生特异结合.结论: 诱骗受体DcR3基因的成功构建、表达及纯化, 为进一步的功能研究奠定了基础.
목적: 구건괄우원핵표체적인유편수체DcR3기인, 병진행중조단백적표체순화급특이성감정.방법: 사득인DcR3 Cdna전서렬, 장기분단설계인물, 통과중첩PCR획득DcR3기인.구건Pet-22b(+)/DcR3표체재체, 전화대장간균Rosseta-gami, IPTG유도표체, Ni주순화.채용ELISA진행특이성감정.결과: 통과중첩PCR획득료편마정학안기산서렬적목적기인.목적단백이포함체적형식표체, 표체량점균체총단백적30%이상.순화후, 단백순도체95%이상.ELISA결과표명소순화적단백가여항DcR3항체발생특이결합.결론: 유편수체DcR3기인적성공구건、표체급순화, 위진일보적공능연구전정료기출.