四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2005年
6期
834-838
,共5页
栾菊%覃扬%徐丹%孙芝琳%孙泽芳
欒菊%覃颺%徐丹%孫芝琳%孫澤芳
란국%담양%서단%손지림%손택방
中药成分%CDP%p16%去甲基化%Huh-7%T47D
中藥成分%CDP%p16%去甲基化%Huh-7%T47D
중약성분%CDP%p16%거갑기화%Huh-7%T47D
目的探讨中药成分CDP对肿瘤细胞系的生长抑制作用及其对抑癌基因p16启动子区CpG岛的去甲基化作用.方法培养人肝癌细胞系Huh-7和乳腺癌细胞系T47D,用MTT法检测药物对肿瘤细胞生长的抑制作用;分别用不同剂量、同一剂量不同时间的CDP和5-azacytidine(5-aza-C)作用细胞;同时提取细胞的DNA,用甲基化特异性PCR (methylation-specific PCR, MSP)的方法观察肿瘤细胞系p16基因启动子区CpG岛甲基化/去甲基化的状态. 结果①Huh-7和T47D细胞系皆为抑癌基因p16启动子区CpG岛完全发生甲基化的肿瘤细胞系.②CDP和5-aza-C以时间、剂量依赖方式抑制Huh-7和T47D增殖.③在25、50、75和100 μmol/L的CDP持续作用6 d后,Huh-7和T47D p16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带仍然存在;Huh-7在四个剂量CDP作用下,非甲基化特异性条带被扩增出,T47D则在50、75和100 μmol/L CDP作用下,非甲基化特异性条带被扩增出.④在50 μmol/L CDP作用后,Huh-7和T47D p16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带仍然存在;Huh-7非甲基化特异性条带自12 h出现并持续到144 h,而T47D非甲基化特异性条带72 h出现并持续到144 h. 结论中药成分CDP可以抑制肿瘤细胞的生长并可以逆转高甲基化的p16基因,具有开发并成为抗肿瘤药物的潜在价值.
目的探討中藥成分CDP對腫瘤細胞繫的生長抑製作用及其對抑癌基因p16啟動子區CpG島的去甲基化作用.方法培養人肝癌細胞繫Huh-7和乳腺癌細胞繫T47D,用MTT法檢測藥物對腫瘤細胞生長的抑製作用;分彆用不同劑量、同一劑量不同時間的CDP和5-azacytidine(5-aza-C)作用細胞;同時提取細胞的DNA,用甲基化特異性PCR (methylation-specific PCR, MSP)的方法觀察腫瘤細胞繫p16基因啟動子區CpG島甲基化/去甲基化的狀態. 結果①Huh-7和T47D細胞繫皆為抑癌基因p16啟動子區CpG島完全髮生甲基化的腫瘤細胞繫.②CDP和5-aza-C以時間、劑量依賴方式抑製Huh-7和T47D增殖.③在25、50、75和100 μmol/L的CDP持續作用6 d後,Huh-7和T47D p16基因啟動子區CpG島甲基化特異性條帶仍然存在;Huh-7在四箇劑量CDP作用下,非甲基化特異性條帶被擴增齣,T47D則在50、75和100 μmol/L CDP作用下,非甲基化特異性條帶被擴增齣.④在50 μmol/L CDP作用後,Huh-7和T47D p16基因啟動子區CpG島甲基化特異性條帶仍然存在;Huh-7非甲基化特異性條帶自12 h齣現併持續到144 h,而T47D非甲基化特異性條帶72 h齣現併持續到144 h. 結論中藥成分CDP可以抑製腫瘤細胞的生長併可以逆轉高甲基化的p16基因,具有開髮併成為抗腫瘤藥物的潛在價值.
목적탐토중약성분CDP대종류세포계적생장억제작용급기대억암기인p16계동자구CpG도적거갑기화작용.방법배양인간암세포계Huh-7화유선암세포계T47D,용MTT법검측약물대종류세포생장적억제작용;분별용불동제량、동일제량불동시간적CDP화5-azacytidine(5-aza-C)작용세포;동시제취세포적DNA,용갑기화특이성PCR (methylation-specific PCR, MSP)적방법관찰종류세포계p16기인계동자구CpG도갑기화/거갑기화적상태. 결과①Huh-7화T47D세포계개위억암기인p16계동자구CpG도완전발생갑기화적종류세포계.②CDP화5-aza-C이시간、제량의뢰방식억제Huh-7화T47D증식.③재25、50、75화100 μmol/L적CDP지속작용6 d후,Huh-7화T47D p16기인계동자구CpG도갑기화특이성조대잉연존재;Huh-7재사개제량CDP작용하,비갑기화특이성조대피확증출,T47D칙재50、75화100 μmol/L CDP작용하,비갑기화특이성조대피확증출.④재50 μmol/L CDP작용후,Huh-7화T47D p16기인계동자구CpG도갑기화특이성조대잉연존재;Huh-7비갑기화특이성조대자12 h출현병지속도144 h,이T47D비갑기화특이성조대72 h출현병지속도144 h. 결론중약성분CDP가이억제종류세포적생장병가이역전고갑기화적p16기인,구유개발병성위항종류약물적잠재개치.
