四川大学学报(医学版)
四川大學學報(醫學版)
사천대학학보(의학판)
JOURNAL OF WEST CHINA UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2004年
5期
607-611
,共5页
冯燮林%张肇达%田聆%魏于全
馮燮林%張肇達%田聆%魏于全
풍섭림%장조체%전령%위우전
胰腺癌%腺病毒%基因治疗%免疫组织化学%细胞周期
胰腺癌%腺病毒%基因治療%免疫組織化學%細胞週期
이선암%선병독%기인치료%면역조직화학%세포주기
目的探讨以腺病毒(Ad5)为载体转染DPC4基因在胰腺癌基因治疗中的作用.方法应用构建的DPC4-Ad5进行体内体外转染,分别观察DPC4-Ad5对胰腺癌细胞(HS766T,Pc-3)及裸鼠皮下种植胰腺癌的影响.用流式细胞仪检测目的基因表达,并检测细胞周期.结果 DPC4-Ad5对胰腺癌细胞的生长抑制率在第4天可达30%.Pc-3-DPC4-Ad5(PD)组细胞生长最慢, HS766T(H)和HS766T-Ad5(HA)组生长最快,与Pc-3(P)、Pc-3-Ad5(PA)、HS766T(H)、HS766T-DPC4-Ad5(HD)组相比均有显著性差异(P<0.05).PD组和HD组细胞增殖受抑,与对照组相比有显著性差异(P<0.05).转染后,细胞周期出现阻滞,G1期细胞明显增加,Pc-3由58%(P组)增至80%(PD组),S期细胞则由26%降至11.7%;HS766TG1期细胞则由58%(H组)左右增至68%(HD组),S期细胞则由31%减少至21%;两组相比有显著性差异(P<0.05).但凋亡未见明显增加.目的基因表达检测也表明,转染DPC4-Ad5后,细胞的荧光强度明显高于未转染者.两种细胞株的裸鼠种植瘤经DPC4-Ad5治疗后,HS766T空载体(对照,HA)组体积为(1363.90±487.65) mm3,HS766T治疗(HD)组为(425.90±324.68) mm3,Pc-3空载体(对照,PA)组为(64.69±24.85) mm3, Pc-3治疗(PD)组为(43.93±16.91) mm3,对照组肿瘤平均肿瘤体积大于治疗组,有统计学差异(P<0.05).裸鼠种植瘤的免疫组织化学检查可见注射区细胞排列较紊乱,并有细胞核的改变.结论构建的腺病毒载体能够将DPC4基因有效地导入胰腺癌细胞.DPC4腺病毒载体无论在体内还是体外,均导致胰腺癌细胞增殖受抑.体外培养细胞,细胞周期出现阻滞,并显著抑制裸鼠皮下胰腺种植瘤的生长.
目的探討以腺病毒(Ad5)為載體轉染DPC4基因在胰腺癌基因治療中的作用.方法應用構建的DPC4-Ad5進行體內體外轉染,分彆觀察DPC4-Ad5對胰腺癌細胞(HS766T,Pc-3)及裸鼠皮下種植胰腺癌的影響.用流式細胞儀檢測目的基因錶達,併檢測細胞週期.結果 DPC4-Ad5對胰腺癌細胞的生長抑製率在第4天可達30%.Pc-3-DPC4-Ad5(PD)組細胞生長最慢, HS766T(H)和HS766T-Ad5(HA)組生長最快,與Pc-3(P)、Pc-3-Ad5(PA)、HS766T(H)、HS766T-DPC4-Ad5(HD)組相比均有顯著性差異(P<0.05).PD組和HD組細胞增殖受抑,與對照組相比有顯著性差異(P<0.05).轉染後,細胞週期齣現阻滯,G1期細胞明顯增加,Pc-3由58%(P組)增至80%(PD組),S期細胞則由26%降至11.7%;HS766TG1期細胞則由58%(H組)左右增至68%(HD組),S期細胞則由31%減少至21%;兩組相比有顯著性差異(P<0.05).但凋亡未見明顯增加.目的基因錶達檢測也錶明,轉染DPC4-Ad5後,細胞的熒光彊度明顯高于未轉染者.兩種細胞株的裸鼠種植瘤經DPC4-Ad5治療後,HS766T空載體(對照,HA)組體積為(1363.90±487.65) mm3,HS766T治療(HD)組為(425.90±324.68) mm3,Pc-3空載體(對照,PA)組為(64.69±24.85) mm3, Pc-3治療(PD)組為(43.93±16.91) mm3,對照組腫瘤平均腫瘤體積大于治療組,有統計學差異(P<0.05).裸鼠種植瘤的免疫組織化學檢查可見註射區細胞排列較紊亂,併有細胞覈的改變.結論構建的腺病毒載體能夠將DPC4基因有效地導入胰腺癌細胞.DPC4腺病毒載體無論在體內還是體外,均導緻胰腺癌細胞增殖受抑.體外培養細胞,細胞週期齣現阻滯,併顯著抑製裸鼠皮下胰腺種植瘤的生長.
목적탐토이선병독(Ad5)위재체전염DPC4기인재이선암기인치료중적작용.방법응용구건적DPC4-Ad5진행체내체외전염,분별관찰DPC4-Ad5대이선암세포(HS766T,Pc-3)급라서피하충식이선암적영향.용류식세포의검측목적기인표체,병검측세포주기.결과 DPC4-Ad5대이선암세포적생장억제솔재제4천가체30%.Pc-3-DPC4-Ad5(PD)조세포생장최만, HS766T(H)화HS766T-Ad5(HA)조생장최쾌,여Pc-3(P)、Pc-3-Ad5(PA)、HS766T(H)、HS766T-DPC4-Ad5(HD)조상비균유현저성차이(P<0.05).PD조화HD조세포증식수억,여대조조상비유현저성차이(P<0.05).전염후,세포주기출현조체,G1기세포명현증가,Pc-3유58%(P조)증지80%(PD조),S기세포칙유26%강지11.7%;HS766TG1기세포칙유58%(H조)좌우증지68%(HD조),S기세포칙유31%감소지21%;량조상비유현저성차이(P<0.05).단조망미견명현증가.목적기인표체검측야표명,전염DPC4-Ad5후,세포적형광강도명현고우미전염자.량충세포주적라서충식류경DPC4-Ad5치료후,HS766T공재체(대조,HA)조체적위(1363.90±487.65) mm3,HS766T치료(HD)조위(425.90±324.68) mm3,Pc-3공재체(대조,PA)조위(64.69±24.85) mm3, Pc-3치료(PD)조위(43.93±16.91) mm3,대조조종류평균종류체적대우치료조,유통계학차이(P<0.05).라서충식류적면역조직화학검사가견주사구세포배렬교문란,병유세포핵적개변.결론구건적선병독재체능구장DPC4기인유효지도입이선암세포.DPC4선병독재체무론재체내환시체외,균도치이선암세포증식수억.체외배양세포,세포주기출현조체,병현저억제라서피하이선충식류적생장.
