广西医学
廣西醫學
엄서의학
GUANGXI MEDICAL JOURNAL
2004年
1期
21-22
,共2页
黄勋%杨俊文%姜岭梅%蔡筱彦%顾红祥%朱惠明
黃勛%楊俊文%薑嶺梅%蔡篠彥%顧紅祥%硃惠明
황훈%양준문%강령매%채소언%고홍상%주혜명
凋亡素%原核表达载体%融合蛋白
凋亡素%原覈錶達載體%融閤蛋白
조망소%원핵표체재체%융합단백
目的构建一种诱导肿瘤细胞凋亡的蛋白质的原核表达系统,以制备抗原物质凋亡素融合蛋白.方法通过PCR的方法,以pcDNA-VP3质粒为模板,扩增出凋亡素VP3基因.将其克隆到原核表达载体pET-DsbA的多克隆位点,构建成凋亡素的高效原核表达载体pET-DsbA-VP3,将该质粒转化到大肠杆菌E.coliBL21(DE3)plysS中,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白.结果转化有凋亡素原核表达载体pET-DsbA-VP3的大肠杆菌E.coliBL21(DE3)plysS经IPTG诱导后,聚丙烯酰胺凝胶电泳出现38.3KD的目的蛋白条带.结论凋亡素原核表达载体pET-DsbA-VP3能高效表达出凋亡素融合蛋白.
目的構建一種誘導腫瘤細胞凋亡的蛋白質的原覈錶達繫統,以製備抗原物質凋亡素融閤蛋白.方法通過PCR的方法,以pcDNA-VP3質粒為模闆,擴增齣凋亡素VP3基因.將其剋隆到原覈錶達載體pET-DsbA的多剋隆位點,構建成凋亡素的高效原覈錶達載體pET-DsbA-VP3,將該質粒轉化到大腸桿菌E.coliBL21(DE3)plysS中,以異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)對其進行誘導錶達,聚丙烯酰胺凝膠電泳分析目的蛋白.結果轉化有凋亡素原覈錶達載體pET-DsbA-VP3的大腸桿菌E.coliBL21(DE3)plysS經IPTG誘導後,聚丙烯酰胺凝膠電泳齣現38.3KD的目的蛋白條帶.結論凋亡素原覈錶達載體pET-DsbA-VP3能高效錶達齣凋亡素融閤蛋白.
목적구건일충유도종류세포조망적단백질적원핵표체계통,이제비항원물질조망소융합단백.방법통과PCR적방법,이pcDNA-VP3질립위모판,확증출조망소VP3기인.장기극륭도원핵표체재체pET-DsbA적다극륭위점,구건성조망소적고효원핵표체재체pET-DsbA-VP3,장해질립전화도대장간균E.coliBL21(DE3)plysS중,이이병기류대-β-D-반유당감(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)대기진행유도표체,취병희선알응효전영분석목적단백.결과전화유조망소원핵표체재체pET-DsbA-VP3적대장간균E.coliBL21(DE3)plysS경IPTG유도후,취병희선알응효전영출현38.3KD적목적단백조대.결론조망소원핵표체재체pET-DsbA-VP3능고효표체출조망소융합단백.
