病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2001年
4期
301-306
,共6页
邹蓓艳%陈立%伍志坚%吴小兵%卢大儒%邱信芳%薛京伦
鄒蓓豔%陳立%伍誌堅%吳小兵%盧大儒%邱信芳%薛京倫
추배염%진립%오지견%오소병%로대유%구신방%설경륜
rHSV/AAV包装系统%单纯疱疹病毒(HSV)%野生型腺伴随病毒%基因治疗%安全性%肌注途径
rHSV/AAV包裝繫統%單純皰疹病毒(HSV)%野生型腺伴隨病毒%基因治療%安全性%肌註途徑
rHSV/AAV포장계통%단순포진병독(HSV)%야생형선반수병독%기인치료%안전성%기주도경
研究了肌注腺伴随病毒(adeno-associated virus,AAV)介导凝血Ⅸ因子基因治疗血友病B的安全性.首先采用PCR、反转录PCR(RT-PCR)分别检测rHSV/AAV包装系统产生的重组腺伴随病毒AAV-mFⅨ,和病毒感染细胞后所得上清再次感染的BHK细胞中的HSV(herpes simplex virus,HSV)和野生型AAV.同时观察HSV引起的细胞毒作用.结果表明:纯化后的AA-mFⅨ中HSV≤1个病毒基因组(viral genome,v.g.)/108个病毒基因组AAV-mFⅨ,且不具备感染活性;没有野生型AAV.其次,采用PCR、RT-PCR、免疫组化等方法检测了AAV-mFⅨ在体内的分布和表达时间;通过抗AAV的抗体检测和病理切片等方法观察了AAV-mFⅨ在体内引起的免疫反应和病理变化.结果表明:AAV-mFⅨ仅分布在注射点肌肉组织内,表达可持续200天以上;抗体水平低,各主要脏器均未发生明显的病理变化.AAV介导的凝血因子Ⅸ系统是安全的.
研究瞭肌註腺伴隨病毒(adeno-associated virus,AAV)介導凝血Ⅸ因子基因治療血友病B的安全性.首先採用PCR、反轉錄PCR(RT-PCR)分彆檢測rHSV/AAV包裝繫統產生的重組腺伴隨病毒AAV-mFⅨ,和病毒感染細胞後所得上清再次感染的BHK細胞中的HSV(herpes simplex virus,HSV)和野生型AAV.同時觀察HSV引起的細胞毒作用.結果錶明:純化後的AA-mFⅨ中HSV≤1箇病毒基因組(viral genome,v.g.)/108箇病毒基因組AAV-mFⅨ,且不具備感染活性;沒有野生型AAV.其次,採用PCR、RT-PCR、免疫組化等方法檢測瞭AAV-mFⅨ在體內的分佈和錶達時間;通過抗AAV的抗體檢測和病理切片等方法觀察瞭AAV-mFⅨ在體內引起的免疫反應和病理變化.結果錶明:AAV-mFⅨ僅分佈在註射點肌肉組織內,錶達可持續200天以上;抗體水平低,各主要髒器均未髮生明顯的病理變化.AAV介導的凝血因子Ⅸ繫統是安全的.
연구료기주선반수병독(adeno-associated virus,AAV)개도응혈Ⅸ인자기인치료혈우병B적안전성.수선채용PCR、반전록PCR(RT-PCR)분별검측rHSV/AAV포장계통산생적중조선반수병독AAV-mFⅨ,화병독감염세포후소득상청재차감염적BHK세포중적HSV(herpes simplex virus,HSV)화야생형AAV.동시관찰HSV인기적세포독작용.결과표명:순화후적AA-mFⅨ중HSV≤1개병독기인조(viral genome,v.g.)/108개병독기인조AAV-mFⅨ,차불구비감염활성;몰유야생형AAV.기차,채용PCR、RT-PCR、면역조화등방법검측료AAV-mFⅨ재체내적분포화표체시간;통과항AAV적항체검측화병리절편등방법관찰료AAV-mFⅨ재체내인기적면역반응화병리변화.결과표명:AAV-mFⅨ부분포재주사점기육조직내,표체가지속200천이상;항체수평저,각주요장기균미발생명현적병리변화.AAV개도적응혈인자Ⅸ계통시안전적.
