第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2002年
6期
515-517
,共3页
弧菌,副溶血性%耐热直接相关溶血素%大肠杆菌%克隆,分子%序列分析
弧菌,副溶血性%耐熱直接相關溶血素%大腸桿菌%剋隆,分子%序列分析
호균,부용혈성%내열직접상관용혈소%대장간균%극륭,분자%서렬분석
目的探讨克隆副溶血弧菌(Vp)耐热直接相关溶血素基因的方法.方法用PCR技术扩增目的基因双酶切载体pGEX-3X和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌DH5α.对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析.结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-91基因组DNA的PCR产物长约600 bp.阳性克隆的PCR产物也为一长约600 bp的条带,经双酶切可切出一约600bp的条带.DNA测序结果表明与GenBank中的序列有99.1%的同源性.结论利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性疫苗以及Vp的致病机制研究奠定了基础.
目的探討剋隆副溶血弧菌(Vp)耐熱直接相關溶血素基因的方法.方法用PCR技術擴增目的基因雙酶切載體pGEX-3X和目的基因DNA,連接併轉化大腸桿菌DH5α.對重組質粒進行PCR鑒定、酶切鑒定和序列分析.結果凝膠電泳顯示,標準株Vp14-91基因組DNA的PCR產物長約600 bp.暘性剋隆的PCR產物也為一長約600 bp的條帶,經雙酶切可切齣一約600bp的條帶.DNA測序結果錶明與GenBank中的序列有99.1%的同源性.結論利用該方法成功剋隆瞭目的基因,為製備用于現場檢測的基因探針和Vp的保護性疫苗以及Vp的緻病機製研究奠定瞭基礎.
목적탐토극륭부용혈호균(Vp)내열직접상관용혈소기인적방법.방법용PCR기술확증목적기인쌍매절재체pGEX-3X화목적기인DNA,련접병전화대장간균DH5α.대중조질립진행PCR감정、매절감정화서렬분석.결과응효전영현시,표준주Vp14-91기인조DNA적PCR산물장약600 bp.양성극륭적PCR산물야위일장약600 bp적조대,경쌍매절가절출일약600bp적조대.DNA측서결과표명여GenBank중적서렬유99.1%적동원성.결론이용해방법성공극륭료목적기인,위제비용우현장검측적기인탐침화Vp적보호성역묘이급Vp적치병궤제연구전정료기출.
