华西医科大学学报
華西醫科大學學報
화서의과대학학보
JOURNAL OF WEST CHINA UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2002年
4期
493-496
,共4页
何畅%屈艺%尹华虎%王若菡%王正荣
何暢%屈藝%尹華虎%王若菡%王正榮
하창%굴예%윤화호%왕약함%왕정영
阿片成瘾%核酶体外切割%period%基因%吗啡
阿片成癮%覈酶體外切割%period%基因%嗎啡
아편성은%핵매체외절할%period%기인%마배
目的探讨per基因与阿片类成瘾的相关性,进而寻找治疗阿片成瘾的基因戒毒疗法.方法设计并合成特异性per锤头状核酶基因和per核酶靶mRNA组分基因,并分别重组入体外转录质粒,而后将经体外转录反应得到per核酶RNA和地高辛标记的per核酶靶mRNA组分.将转录产物混合,在不同条件下进行体外切割反应后,采用地高辛化学发光法检测per核酶的体外切割效率.小鼠脑室注射直接导入脂质体包裹的重组质粒pcDNA 3.1-per RZ DNA,按剂量递增法建立吗啡依赖动物模型,用纳洛酮催瘾,观察戒断反应的变化.结果 per核酶对per核酶靶mRNA组分的体外切割效率达到60% .重组质粒组小鼠的刻板跳跃、"湿狗"样抖动和打洞次数与空质粒组、生理盐水组相比明显减少,但并不抑制小鼠的体重下降.结论 per核酶具有体外定点切割per基因mRNA组分的活性.经小鼠吗啡成瘾模型检测,该重组质粒能成功转染活体小鼠脑细胞并在脑组织内稳定表达per核酶,发挥阻断per基因表达的作用,有效地减轻吗啡成瘾的戒断症状.
目的探討per基因與阿片類成癮的相關性,進而尋找治療阿片成癮的基因戒毒療法.方法設計併閤成特異性per錘頭狀覈酶基因和per覈酶靶mRNA組分基因,併分彆重組入體外轉錄質粒,而後將經體外轉錄反應得到per覈酶RNA和地高辛標記的per覈酶靶mRNA組分.將轉錄產物混閤,在不同條件下進行體外切割反應後,採用地高辛化學髮光法檢測per覈酶的體外切割效率.小鼠腦室註射直接導入脂質體包裹的重組質粒pcDNA 3.1-per RZ DNA,按劑量遞增法建立嗎啡依賴動物模型,用納洛酮催癮,觀察戒斷反應的變化.結果 per覈酶對per覈酶靶mRNA組分的體外切割效率達到60% .重組質粒組小鼠的刻闆跳躍、"濕狗"樣抖動和打洞次數與空質粒組、生理鹽水組相比明顯減少,但併不抑製小鼠的體重下降.結論 per覈酶具有體外定點切割per基因mRNA組分的活性.經小鼠嗎啡成癮模型檢測,該重組質粒能成功轉染活體小鼠腦細胞併在腦組織內穩定錶達per覈酶,髮揮阻斷per基因錶達的作用,有效地減輕嗎啡成癮的戒斷癥狀.
목적탐토per기인여아편류성은적상관성,진이심조치료아편성은적기인계독요법.방법설계병합성특이성per추두상핵매기인화per핵매파mRNA조분기인,병분별중조입체외전록질립,이후장경체외전록반응득도per핵매RNA화지고신표기적per핵매파mRNA조분.장전록산물혼합,재불동조건하진행체외절할반응후,채용지고신화학발광법검측per핵매적체외절할효솔.소서뇌실주사직접도입지질체포과적중조질립pcDNA 3.1-per RZ DNA,안제량체증법건립마배의뢰동물모형,용납락동최은,관찰계단반응적변화.결과 per핵매대per핵매파mRNA조분적체외절할효솔체도60% .중조질립조소서적각판도약、"습구"양두동화타동차수여공질립조、생리염수조상비명현감소,단병불억제소서적체중하강.결론 per핵매구유체외정점절할per기인mRNA조분적활성.경소서마배성은모형검측,해중조질립능성공전염활체소서뇌세포병재뇌조직내은정표체per핵매,발휘조단per기인표체적작용,유효지감경마배성은적계단증상.
