第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2002年
2期
132-135
,共4页
王梁华%朱玉平%娄永华%周劲松%彭玉珍%球谊%焦炳华
王樑華%硃玉平%婁永華%週勁鬆%彭玉珍%毬誼%焦炳華
왕량화%주옥평%루영화%주경송%팽옥진%구의%초병화
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体%重组蛋白质%发酵%分批 补料
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體%重組蛋白質%髮酵%分批 補料
종류배사인자상관조망유도배체%중조단백질%발효%분비 보료
目的:利用原核重组表达技术,完成人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL,又称凋亡素2配体,Apo-2L)的中试.方法: 可溶性TRAIL编码基因插入改建的pBV220载体;在发酵过程中,控制溶解氧在30%～50% ,30℃生长6 h,42℃诱导培养4 h;菌体上清行金属亲和层析.结果:发酵液中最终菌体密度D(600)达8.0(相当于每升发酵液含15 g湿菌体),TRAIL占菌体总蛋白的40%左右,含量超过0.6 g/L.其中,所表达的TRAIL 20%～30%在上清而直接有活性,70%～80%呈包涵体.上清用亲和层析一步使其纯度达70%以上;包涵体超声破菌后经两次洗涤,纯度达到80%以上. 结论:TRAIL在大肠杆菌中达到了高表达.
目的:利用原覈重組錶達技術,完成人可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL,又稱凋亡素2配體,Apo-2L)的中試.方法: 可溶性TRAIL編碼基因插入改建的pBV220載體;在髮酵過程中,控製溶解氧在30%～50% ,30℃生長6 h,42℃誘導培養4 h;菌體上清行金屬親和層析.結果:髮酵液中最終菌體密度D(600)達8.0(相噹于每升髮酵液含15 g濕菌體),TRAIL佔菌體總蛋白的40%左右,含量超過0.6 g/L.其中,所錶達的TRAIL 20%～30%在上清而直接有活性,70%～80%呈包涵體.上清用親和層析一步使其純度達70%以上;包涵體超聲破菌後經兩次洗滌,純度達到80%以上. 結論:TRAIL在大腸桿菌中達到瞭高錶達.
목적:이용원핵중조표체기술,완성인가용성종류배사인자상관조망유도배체(TRAIL,우칭조망소2배체,Apo-2L)적중시.방법: 가용성TRAIL편마기인삽입개건적pBV220재체;재발효과정중,공제용해양재30%～50% ,30℃생장6 h,42℃유도배양4 h;균체상청행금속친화층석.결과:발효액중최종균체밀도D(600)체8.0(상당우매승발효액함15 g습균체),TRAIL점균체총단백적40%좌우,함량초과0.6 g/L.기중,소표체적TRAIL 20%～30%재상청이직접유활성,70%～80%정포함체.상청용친화층석일보사기순도체70%이상;포함체초성파균후경량차세조,순도체도80%이상. 결론:TRAIL재대장간균중체도료고표체.
