中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2002年
1期
94-95
,共2页
李莲军%李德雪%张学明%文兴豪%岳占碰%王延钊
李蓮軍%李德雪%張學明%文興豪%嶽佔踫%王延釗
리련군%리덕설%장학명%문흥호%악점팽%왕연쇠
抗冻剂%冷冻保存%生精上皮%精原细胞%小鼠
抗凍劑%冷凍保存%生精上皮%精原細胞%小鼠
항동제%냉동보존%생정상피%정원세포%소서
在DMEM中添加10%小牛血清(NBS).并分别添加不同浓度的抗冻剂二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PG)、乙二醇(EG)及甘油(G),对7日龄小鼠生精上皮单细胞进行冷冻保存,复苏后台盼蓝染色测定细胞复苏率.结果:当冻存液中DMSO分别为5%、10%、1 5%、20%、25%时,细胞复苏率分别为77.1%、88.2%、86.5%、73.5 %、65.5%.其中10%和1 5%DMSO组细胞复苏率最高,与其余各组间均差异极显著(P<0.01).当冻存液中PG分别为5%、10%、15%、20%、25%时,细胞复苏率分别为66.2%、84.3%、72.1%、69.9%、47.5%,其中10%PG组细胞复苏率最高.与其余各组间均差异极显著(P<0.01).当冻存液中EG分别为5%、10%、1 5%、20%时,细胞复苏率分别为64.9%、81.6%、60.9%、44.7%,其中10%EG组细胞复苏率最高,与其余各组间均差异极显著(P<0.01).当冻存液中G分别为5%、10%、1 5%、20%、25%时,细胞腹苏率均低于10%.10%DMSO组细胞复苏率与10%PG组和10%EG组之间均差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01).结果表明,10%DMSO、10%PG及10%EG均适宜冷冻保存小鼠精原细胞,以10%DMSO的冻存效果最好,而G则不适宜冷冻保存.在含10%DMSO的冻存液中,二步慢速冷冻,液氮储存,37 C水浴复苏小鼠精原细胞,是一种具有较高细胞复苏率的冷冻保存方法.
在DMEM中添加10%小牛血清(NBS).併分彆添加不同濃度的抗凍劑二甲基亞砜(DMSO)、丙二醇(PG)、乙二醇(EG)及甘油(G),對7日齡小鼠生精上皮單細胞進行冷凍保存,複囌後檯盼藍染色測定細胞複囌率.結果:噹凍存液中DMSO分彆為5%、10%、1 5%、20%、25%時,細胞複囌率分彆為77.1%、88.2%、86.5%、73.5 %、65.5%.其中10%和1 5%DMSO組細胞複囌率最高,與其餘各組間均差異極顯著(P<0.01).噹凍存液中PG分彆為5%、10%、15%、20%、25%時,細胞複囌率分彆為66.2%、84.3%、72.1%、69.9%、47.5%,其中10%PG組細胞複囌率最高.與其餘各組間均差異極顯著(P<0.01).噹凍存液中EG分彆為5%、10%、1 5%、20%時,細胞複囌率分彆為64.9%、81.6%、60.9%、44.7%,其中10%EG組細胞複囌率最高,與其餘各組間均差異極顯著(P<0.01).噹凍存液中G分彆為5%、10%、1 5%、20%、25%時,細胞腹囌率均低于10%.10%DMSO組細胞複囌率與10%PG組和10%EG組之間均差異顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01).結果錶明,10%DMSO、10%PG及10%EG均適宜冷凍保存小鼠精原細胞,以10%DMSO的凍存效果最好,而G則不適宜冷凍保存.在含10%DMSO的凍存液中,二步慢速冷凍,液氮儲存,37 C水浴複囌小鼠精原細胞,是一種具有較高細胞複囌率的冷凍保存方法.
재DMEM중첨가10%소우혈청(NBS).병분별첨가불동농도적항동제이갑기아풍(DMSO)、병이순(PG)、을이순(EG)급감유(G),대7일령소서생정상피단세포진행냉동보존,복소후태반람염색측정세포복소솔.결과:당동존액중DMSO분별위5%、10%、1 5%、20%、25%시,세포복소솔분별위77.1%、88.2%、86.5%、73.5 %、65.5%.기중10%화1 5%DMSO조세포복소솔최고,여기여각조간균차이겁현저(P<0.01).당동존액중PG분별위5%、10%、15%、20%、25%시,세포복소솔분별위66.2%、84.3%、72.1%、69.9%、47.5%,기중10%PG조세포복소솔최고.여기여각조간균차이겁현저(P<0.01).당동존액중EG분별위5%、10%、1 5%、20%시,세포복소솔분별위64.9%、81.6%、60.9%、44.7%,기중10%EG조세포복소솔최고,여기여각조간균차이겁현저(P<0.01).당동존액중G분별위5%、10%、1 5%、20%、25%시,세포복소솔균저우10%.10%DMSO조세포복소솔여10%PG조화10%EG조지간균차이현저(P<0.05)혹겁현저(P<0.01).결과표명,10%DMSO、10%PG급10%EG균괄의냉동보존소서정원세포,이10%DMSO적동존효과최호,이G칙불괄의냉동보존.재함10%DMSO적동존액중,이보만속냉동,액담저존,37 C수욕복소소서정원세포,시일충구유교고세포복소솔적냉동보존방법.