遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2001年
1期
21-24
,共4页
朱天慧%秦刚%张立冬%刘志霈%张杰%Brigitte Royer-Pokora
硃天慧%秦剛%張立鼕%劉誌霈%張傑%Brigitte Royer-Pokora
주천혜%진강%장입동%류지패%장걸%Brigitte Royer-Pokora
LIM%Dlmo%转录因子%胞浆蛋白
LIM%Dlmo%轉錄因子%胞漿蛋白
LIM%Dlmo%전록인자%포장단백
为了获取研究Dlmo(果蝇LMO基因的简称)的功能信息,使用耦联网织红细胞体外翻译系统将Dlmo基因进行体外转录翻译得到32 kDa的蛋白产物。该蛋白产物与抗人类LMO2蛋白的多抗抗体发生免疫沉淀,并得到了32 kDa的阳性带。为了证实Dlmo基因在体外和体内翻译能得到同一大小蛋白,从2~4小时果蝇胚盘中分别抽提核和胞浆提取物进行Western印迹分析,免疫血清可以识别胞浆提取物中的32kDa蛋白,而在核提取物中未曾见到,证实体外和体内翻译产物相同。免疫组织化学的分析在0~4小时胚盘外周胞浆中有Dlmo基因的阳性染色信号,结果证实,Dlmo与人类LMO不同,其表达产物是一个胞浆蛋白。
為瞭穫取研究Dlmo(果蠅LMO基因的簡稱)的功能信息,使用耦聯網織紅細胞體外翻譯繫統將Dlmo基因進行體外轉錄翻譯得到32 kDa的蛋白產物。該蛋白產物與抗人類LMO2蛋白的多抗抗體髮生免疫沉澱,併得到瞭32 kDa的暘性帶。為瞭證實Dlmo基因在體外和體內翻譯能得到同一大小蛋白,從2~4小時果蠅胚盤中分彆抽提覈和胞漿提取物進行Western印跡分析,免疫血清可以識彆胞漿提取物中的32kDa蛋白,而在覈提取物中未曾見到,證實體外和體內翻譯產物相同。免疫組織化學的分析在0~4小時胚盤外週胞漿中有Dlmo基因的暘性染色信號,結果證實,Dlmo與人類LMO不同,其錶達產物是一箇胞漿蛋白。
위료획취연구Dlmo(과승LMO기인적간칭)적공능신식,사용우련망직홍세포체외번역계통장Dlmo기인진행체외전록번역득도32 kDa적단백산물。해단백산물여항인류LMO2단백적다항항체발생면역침정,병득도료32 kDa적양성대。위료증실Dlmo기인재체외화체내번역능득도동일대소단백,종2~4소시과승배반중분별추제핵화포장제취물진행Western인적분석,면역혈청가이식별포장제취물중적32kDa단백,이재핵제취물중미증견도,증실체외화체내번역산물상동。면역조직화학적분석재0~4소시배반외주포장중유Dlmo기인적양성염색신호,결과증실,Dlmo여인류LMO불동,기표체산물시일개포장단백。
In order to gain some insight into a possible function of Dlmo gene,we used the TNT coupled reticulocyte lysate systems as an in vitro translation system to detect the Drosoplila protein. We found a 32kDa protein product.To demonstrate that the DLMO protein has the same size in vivo as in vitro we studied nuclear and cytoplasmic extracts from 2-4h embryos in Western blots. The immuno serum recognizes a 32kDa protein in the cytoplasm that is not present in the nucleus.The products were immune precipitated with the polyclonal anti-LMO2 antibody raised against the human protein and seen a positive band of 32kDa.Using immuno histochemical analysis was seen a positive staining in the basal cytoplasm of blastoderm embryos at 4 hours. This result confirms that the DLMO is a cytoplasmprotein, not like human LMO protein.