中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2000年
6期
318-321
,共4页
隋建华%宋增璇%佘鸣%张丽艳%沈德诚%韩忠朝
隋建華%宋增璇%佘鳴%張麗豔%瀋德誠%韓忠朝
수건화%송증선%사명%장려염%침덕성%한충조
Kgla%噬菌体展示%抗体库%scFv
Kgla%噬菌體展示%抗體庫%scFv
Kgla%서균체전시%항체고%scFv
目的:用噬菌体展示技术构建KGla免疫小鼠的脾细胞scFv表达文库.方法:用人髓系白血病细胞系KGla细胞免疫小鼠,取其脾细胞,RT-PCR扩增VH和Vκ基因并克隆入噬菌体展示表达载体,构建scFv文库,并测定文库的库容量和BstN1酶切单个克隆分析文库的多样性.用KGla作为固相抗原,进行四轮吸附-洗脱-富集的筛选,SDS-PAGE检验筛选后文库scFv的呈示表达.结果:文库的库容为3×106cfu,单个克隆的BstN1 Ⅰ酶切图谱显示多样,提示文库的容量和多样性均能满足进一步筛选分离目的基因的需要,筛选后的文库能很好地表达外源scFv.结论:文库的构建为进一步地分离KGla细胞表面分子抗体基因提供了必要而可靠的基础.
目的:用噬菌體展示技術構建KGla免疫小鼠的脾細胞scFv錶達文庫.方法:用人髓繫白血病細胞繫KGla細胞免疫小鼠,取其脾細胞,RT-PCR擴增VH和Vκ基因併剋隆入噬菌體展示錶達載體,構建scFv文庫,併測定文庫的庫容量和BstN1酶切單箇剋隆分析文庫的多樣性.用KGla作為固相抗原,進行四輪吸附-洗脫-富集的篩選,SDS-PAGE檢驗篩選後文庫scFv的呈示錶達.結果:文庫的庫容為3×106cfu,單箇剋隆的BstN1 Ⅰ酶切圖譜顯示多樣,提示文庫的容量和多樣性均能滿足進一步篩選分離目的基因的需要,篩選後的文庫能很好地錶達外源scFv.結論:文庫的構建為進一步地分離KGla細胞錶麵分子抗體基因提供瞭必要而可靠的基礎.
목적:용서균체전시기술구건KGla면역소서적비세포scFv표체문고.방법:용인수계백혈병세포계KGla세포면역소서,취기비세포,RT-PCR확증VH화Vκ기인병극륭입서균체전시표체재체,구건scFv문고,병측정문고적고용량화BstN1매절단개극륭분석문고적다양성.용KGla작위고상항원,진행사륜흡부-세탈-부집적사선,SDS-PAGE검험사선후문고scFv적정시표체.결과:문고적고용위3×106cfu,단개극륭적BstN1 Ⅰ매절도보현시다양,제시문고적용량화다양성균능만족진일보사선분리목적기인적수요,사선후적문고능흔호지표체외원scFv.결론:문고적구건위진일보지분리KGla세포표면분자항체기인제공료필요이가고적기출.
