人乳腺癌全套抗体可变区基因的扩增与克隆
인유선암전투항체가변구기인적확증여극륭
Amplification of all human V genes of breast carcinoma from peripheral lymphadens
  • 万方数据
    西安交通大学学报（医学版） 서안교통대학학보（의학판）
    JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
    2004年 6期 558-561 ,共4页

    吕勇刚%窦科峰%吴昱彤%赵爱志%刘杰%陈刚%陶开山%药立波

    려용강%두과봉%오욱동%조애지%류걸%진강%도개산%약립파

    聚合酶链式反应%乳腺癌%抗体基因%T载体 聚閤酶鏈式反應%乳腺癌%抗體基因%T載體
    취합매련식반응%유선암%항체기인%T재체
    目的扩增人乳腺癌抗体全套可变区基因,将其克隆到T载体来构建T载体文库.方法收集乳腺癌患者外周转移淋巴结30例,TRIzol法提取总RNA、纯化mRNA,行RT-PCR扩增,制备T载体,用于PCR产物的克隆.结果总RNA纯度高,完整性好,mRNA获得率为1%.经RT-PCR,VH、Vλ、Vκ的每一条5＇端引物均与其相应的3＇端引物成功地扩增出了可变区基因片段,轻、重链T载体库分别为1.7×108和3.5×108.结论所采用的引物能够100%扩增目的片段,T载体过渡能显著提高克隆效率,为噬菌体抗体库的构建和筛选奠定了基础.
    목적확증인유선암항체전투가변구기인,장기극륭도T재체래구건T재체문고.방법수집유선암환자외주전이림파결30례,TRIzol법제취총RNA、순화mRNA,행RT-PCR확증,제비T재체,용우PCR산물적극륭.결과총RNA순도고,완정성호,mRNA획득솔위1%.경RT-PCR,VH、Vλ、Vκ적매일조5＇단인물균여기상응적3＇단인물성공지확증출료가변구기인편단,경、중련T재체고분별위1.7×108화3.5×108.결론소채용적인물능구100%확증목적편단,T재체과도능현저제고극륭효솔,위서균체항체고적구건화사선전정료기출.
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