四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2005年
3期
584-587
,共4页
肖冰%孙元田%徐洁杰%潘克俭%胡火珍
肖冰%孫元田%徐潔傑%潘剋儉%鬍火珍
초빙%손원전%서길걸%반극검%호화진
人干细胞因子%原核表达%纯化
人榦細胞因子%原覈錶達%純化
인간세포인자%원핵표체%순화
用Trizol提取人骨髓总RNA,通过RT-PCR扩增人干细胞因子DNA,克隆到pMD1 8-T载体中并测序.将其定向连入原核表达载体pET32a(+),获得了重组表达载体pET32a(+)/hSCF,其cDNA长度为504bp,测序结果与已知序列吻合.然后在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达,获得37kD的融合蛋白,约占茵体总蛋白量的30%.经Ni2+ -NTA树脂亲和层析柱纯化获得纯度大约90%的重组蛋白.
用Trizol提取人骨髓總RNA,通過RT-PCR擴增人榦細胞因子DNA,剋隆到pMD1 8-T載體中併測序.將其定嚮連入原覈錶達載體pET32a(+),穫得瞭重組錶達載體pET32a(+)/hSCF,其cDNA長度為504bp,測序結果與已知序列吻閤.然後在大腸桿菌BL21中經IPTG誘導錶達,穫得37kD的融閤蛋白,約佔茵體總蛋白量的30%.經Ni2+ -NTA樹脂親和層析柱純化穫得純度大約90%的重組蛋白.
용Trizol제취인골수총RNA,통과RT-PCR확증인간세포인자DNA,극륭도pMD1 8-T재체중병측서.장기정향련입원핵표체재체pET32a(+),획득료중조표체재체pET32a(+)/hSCF,기cDNA장도위504bp,측서결과여이지서렬문합.연후재대장간균BL21중경IPTG유도표체,획득37kD적융합단백,약점인체총단백량적30%.경Ni2+ -NTA수지친화층석주순화획득순도대약90%적중조단백.
