四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2008年
1期
10-14
,共5页
官立丽%彭芝兰%牛晓宇%王红静%王丹青
官立麗%彭芝蘭%牛曉宇%王紅靜%王丹青
관립려%팽지란%우효우%왕홍정%왕단청
siRNA%宫颈癌%HPV16 E6%细胞增殖%细胞周期
siRNA%宮頸癌%HPV16 E6%細胞增殖%細胞週期
siRNA%궁경암%HPV16 E6%세포증식%세포주기
目的 观察HPV16 E6小干扰RNA(si RNA)能否抑制宫颈癌细胞生长,并探讨其作用机理.方法 化学合成针对 HPV16 E6的siRNA,借脂质体转染宫颈癌CaSki细胞,应用细胞计数的方法测定细胞生长 曲线、活细胞率及细胞生长抑制率.运用实时荧光定量RT-PCR、流式细胞术检测转染后不同时间点细胞周期、HPV16 E6、p53、p21 mRNA及蛋白表达的变化.结果 转染HPV16 E6 siRNA后,细胞生长明显受到抑制.流式细胞术结果 显示并未将细胞 阻滞在G1期.实时荧光定量RT-PCR显示,转染24 h,E6 mRNA的表达比空白组降低了 20.11倍(P＜0.05),而p53、p21 mRNA的表达无明显变化.转染48 h,E6蛋白表达明显下调,Pp53、P21蛋白表达相应地升高.结论 HPV16 E6 siRNA 可通过特异、高效地沉默宫颈癌细胞E6 mRNA的表达,减少对野生型p53的降解,恢复 P53蛋白的功能活性而发挥抑制宫颈癌细胞生长的作用.
目的 觀察HPV16 E6小榦擾RNA(si RNA)能否抑製宮頸癌細胞生長,併探討其作用機理.方法 化學閤成針對 HPV16 E6的siRNA,藉脂質體轉染宮頸癌CaSki細胞,應用細胞計數的方法測定細胞生長 麯線、活細胞率及細胞生長抑製率.運用實時熒光定量RT-PCR、流式細胞術檢測轉染後不同時間點細胞週期、HPV16 E6、p53、p21 mRNA及蛋白錶達的變化.結果 轉染HPV16 E6 siRNA後,細胞生長明顯受到抑製.流式細胞術結果 顯示併未將細胞 阻滯在G1期.實時熒光定量RT-PCR顯示,轉染24 h,E6 mRNA的錶達比空白組降低瞭 20.11倍(P＜0.05),而p53、p21 mRNA的錶達無明顯變化.轉染48 h,E6蛋白錶達明顯下調,Pp53、P21蛋白錶達相應地升高.結論 HPV16 E6 siRNA 可通過特異、高效地沉默宮頸癌細胞E6 mRNA的錶達,減少對野生型p53的降解,恢複 P53蛋白的功能活性而髮揮抑製宮頸癌細胞生長的作用.
목적 관찰HPV16 E6소간우RNA(si RNA)능부억제궁경암세포생장,병탐토기작용궤리.방법 화학합성침대 HPV16 E6적siRNA,차지질체전염궁경암CaSki세포,응용세포계수적방법측정세포생장 곡선、활세포솔급세포생장억제솔.운용실시형광정량RT-PCR、류식세포술검측전염후불동시간점세포주기、HPV16 E6、p53、p21 mRNA급단백표체적변화.결과 전염HPV16 E6 siRNA후,세포생장명현수도억제.류식세포술결과 현시병미장세포 조체재G1기.실시형광정량RT-PCR현시,전염24 h,E6 mRNA적표체비공백조강저료 20.11배(P＜0.05),이p53、p21 mRNA적표체무명현변화.전염48 h,E6단백표체명현하조,Pp53、P21단백표체상응지승고.결론 HPV16 E6 siRNA 가통과특이、고효지침묵궁경암세포E6 mRNA적표체,감소대야생형p53적강해,회복 P53단백적공능활성이발휘억제궁경암세포생장적작용.
