南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2009年
6期
1265-1267
,共3页
马真%蔡绍曦%佟万成%耿穗娜%卢健聪%赵海金
馬真%蔡紹晞%佟萬成%耿穗娜%盧健聰%趙海金
마진%채소희%동만성%경수나%로건총%조해금
鲍曼不动杆菌%外膜蛋白%融合蛋向%多克隆抗体
鮑曼不動桿菌%外膜蛋白%融閤蛋嚮%多剋隆抗體
포만불동간균%외막단백%융합단향%다극륭항체
目的 表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的鲍曼不动杆菌杆菌外膜蛋白Caro(-binding protein)融合蛋白并制备抗Caro多克隆抗体,为研究临床鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制奠定基础.方法 构建pET23d-CarO重组表达质粒,转入大肠埃希菌BL21(DE3),以IPTG诱导6×His-CarO融合蛋白表达,经镍离子金属螯合树脂纯化后,用纯化出的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,Western印迹检测多克隆抗体的特异性.结果 在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的His-CarO融合蛋白,经亲和树脂纯化后免疫新西兰大白兔,获得了高特异性的抗CarO抗血清.结论 成功构建pET23d-CarO原核表达质粒,表达并纯化出目标蛋白,制备出高特异性的多克隆抗体.
目的 錶達和純化帶多聚組氨痠(6×His)標籤的鮑曼不動桿菌桿菌外膜蛋白Caro(-binding protein)融閤蛋白併製備抗Caro多剋隆抗體,為研究臨床鮑曼不動桿菌對碳青黴烯類抗生素耐藥機製奠定基礎.方法 構建pET23d-CarO重組錶達質粒,轉入大腸埃希菌BL21(DE3),以IPTG誘導6×His-CarO融閤蛋白錶達,經鎳離子金屬螯閤樹脂純化後,用純化齣的蛋白免疫傢兔製備多剋隆抗體,Western印跡檢測多剋隆抗體的特異性.結果 在大腸埃希菌中誘導齣高水平錶達的His-CarO融閤蛋白,經親和樹脂純化後免疫新西蘭大白兔,穫得瞭高特異性的抗CarO抗血清.結論 成功構建pET23d-CarO原覈錶達質粒,錶達併純化齣目標蛋白,製備齣高特異性的多剋隆抗體.
목적 표체화순화대다취조안산(6×His)표첨적포만불동간균간균외막단백Caro(-binding protein)융합단백병제비항Caro다극륭항체,위연구림상포만불동간균대탄청매희류항생소내약궤제전정기출.방법 구건pET23d-CarO중조표체질립,전입대장애희균BL21(DE3),이IPTG유도6×His-CarO융합단백표체,경얼리자금속오합수지순화후,용순화출적단백면역가토제비다극륭항체,Western인적검측다극륭항체적특이성.결과 재대장애희균중유도출고수평표체적His-CarO융합단백,경친화수지순화후면역신서란대백토,획득료고특이성적항CarO항혈청.결론 성공구건pET23d-CarO원핵표체질립,표체병순화출목표단백,제비출고특이성적다극륭항체.
