分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2012年
3期
365-370
,共6页
杨旭光%徐晓煜%李家璜%姚其正%朱彤阳%华子春%郑伟娟
楊旭光%徐曉煜%李傢璜%姚其正%硃彤暘%華子春%鄭偉娟
양욱광%서효욱%리가황%요기정%주동양%화자춘%정위연
雷公藤内酯醇%类固醇生成因子-1%噬菌体随机肽库%荧光光谱%等温滴定量热
雷公籐內酯醇%類固醇生成因子-1%噬菌體隨機肽庫%熒光光譜%等溫滴定量熱
뢰공등내지순%류고순생성인자-1%서균체수궤태고%형광광보%등온적정량열
采用噬菌体展示肽库技术筛选雷公藤内酯醇的靶蛋白,得到了一个肽段,并通过酶联免疫吸附(ELISA)和免疫共沉淀验证了该片段对雷公藤内酯醇的结合特异性.用Basic Local Alignment Search Tool (BLAST)进行序列对比后,找到了77个匹配序列,其中最为匹配的序列是人类类固醇生成因子-1(hSF-1),因此hSF-1可能是雷公藤内酯醇的一个潜在受体.在大肠杆菌中表达纯化了hSF-1的配体结合域(LBD),荧光光谱实验表明雷公藤内酯醇对hSF-1-LBD有荧光淬灭作用、等温滴定量热(ITC)实验表明雷公藤内酯醇与hSF-1-LBD发生焓驱动的特异性结合,表面等离子体共振(SPR)实验表明雷公藤内酯醇可以与hSF-1-LBD剂量依赖性结合,这些都证实了hSF-1与雷公藤内酯醇存在特异性相互作用.
採用噬菌體展示肽庫技術篩選雷公籐內酯醇的靶蛋白,得到瞭一箇肽段,併通過酶聯免疫吸附(ELISA)和免疫共沉澱驗證瞭該片段對雷公籐內酯醇的結閤特異性.用Basic Local Alignment Search Tool (BLAST)進行序列對比後,找到瞭77箇匹配序列,其中最為匹配的序列是人類類固醇生成因子-1(hSF-1),因此hSF-1可能是雷公籐內酯醇的一箇潛在受體.在大腸桿菌中錶達純化瞭hSF-1的配體結閤域(LBD),熒光光譜實驗錶明雷公籐內酯醇對hSF-1-LBD有熒光淬滅作用、等溫滴定量熱(ITC)實驗錶明雷公籐內酯醇與hSF-1-LBD髮生焓驅動的特異性結閤,錶麵等離子體共振(SPR)實驗錶明雷公籐內酯醇可以與hSF-1-LBD劑量依賴性結閤,這些都證實瞭hSF-1與雷公籐內酯醇存在特異性相互作用.
채용서균체전시태고기술사선뢰공등내지순적파단백,득도료일개태단,병통과매련면역흡부(ELISA)화면역공침정험증료해편단대뢰공등내지순적결합특이성.용Basic Local Alignment Search Tool (BLAST)진행서렬대비후,조도료77개필배서렬,기중최위필배적서렬시인류류고순생성인자-1(hSF-1),인차hSF-1가능시뢰공등내지순적일개잠재수체.재대장간균중표체순화료hSF-1적배체결합역(LBD),형광광보실험표명뢰공등내지순대hSF-1-LBD유형광쉬멸작용、등온적정량열(ITC)실험표명뢰공등내지순여hSF-1-LBD발생함구동적특이성결합,표면등리자체공진(SPR)실험표명뢰공등내지순가이여hSF-1-LBD제량의뢰성결합,저사도증실료hSF-1여뢰공등내지순존재특이성상호작용.
