环式增强型绿色荧光蛋白热稳定性及Npu DnaE内含肽高反式剪接效率研究
배식증강형록색형광단백열은정성급Npu DnaE내함태고반식전접효솔연구
Thermostability of cyclic EGFP and highly efficient protein trans-splicing of Npu DnaE intein
  • 万方数据
    军事医学 군사의학
    BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
    2012年 4期 253-257,262 ,共6页

    叶丙雨%王政%李德彬%张乐之%肖丽霞%张部昌%曹诚%赵志虎

    협병우%왕정%리덕빈%장악지%초려하%장부창%조성%조지호

    蛋白环化%内含肽类%Cyc-EGFP%反式剪接%热稳定性 蛋白環化%內含肽類%Cyc-EGFP%反式剪接%熱穩定性
    단백배화%내함태류%Cyc-EGFP%반식전접%열은정성
    目的 在体内借助Npu DnaE内含肽(intein)的高效反式剪接作用获得环式增强型绿色荧光蛋白(Cyc-EGFP).方法 对构建的融合表达载体pET/Npu DnaE intein/EGFP-28a( + )进行诱导、表达,之后利用亲和纯化获得高纯度的Cyc-EGFP和增强型绿色荧光蛋白(EGFP),并对二者的荧光强度和热稳定性进行比较.结果 Npu DnaE内含肽环化效率可达98%以上,明显优于Ssp DnaE内含肽,环化后的EGFP热稳定性提高了4～5℃.结论 Cyc-EGFP这一明显优势使蛋白环化在蛋白质工程等领域具有重要的应用价值.
    목적 재체내차조Npu DnaE내함태(intein)적고효반식전접작용획득배식증강형록색형광단백(Cyc-EGFP).방법 대구건적융합표체재체pET/Npu DnaE intein/EGFP-28a( + )진행유도、표체,지후이용친화순화획득고순도적Cyc-EGFP화증강형록색형광단백(EGFP),병대이자적형광강도화열은정성진행비교.결과 Npu DnaE내함태배화효솔가체98%이상,명현우우Ssp DnaE내함태,배화후적EGFP열은정성제고료4～5℃.결론 Cyc-EGFP저일명현우세사단백배화재단백질공정등영역구유중요적응용개치.
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