HIV-1包膜蛋白ENV慢病毒载体的构建及表达
HIV-1포막단백ENV만병독재체적구건급표체
Lentivirus construction and expression in outer membrane protein ENV of HIV-1
  • 万方数据
    中国免疫学杂志 중국면역학잡지
    CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
    2012年 5期 440-443 ,共4页

    孙丹丹%李昌%李太元%朱娜%杜寿文%任大勇%刘存霞%秦艳青%李沂%金宁一

    손단단%리창%리태원%주나%두수문%임대용%류존하%진염청%리기%금저일

    ENV%HIV-1%慢病毒载体%真核表达 ENV%HIV-1%慢病毒載體%真覈錶達
    ENV%HIV-1%만병독재체%진핵표체
    目的 构建表达HIV-1包膜蛋白ENV的慢病毒载体,感染人胚肾细胞HEK293T,观察env基因在HEK293T中的表达.方法 通过点突变获得HIV-1 env完整基因,将env基因亚克隆至慢病毒穿梭载体pLVX-IRES-ZsGreen1的EcoRⅠ、XhoⅠ位点,构建重组质粒pLV-env,采用脂质体转染法转染HEK293T,经RT-PCR、Western blot检测目的基因表达,同时利用激光共聚焦技术对env基因的表达进行了定位.结果 成功获得了HIV-1 env基因,构建了重组慢病毒质粒pLV-env,RT-PCR、Western blot检测均表明外源基因能够表达,并具有抗原性,同时env基因表达后可以分泌到细胞膜表面膜上.结论 成功构建了含有HIV-1包膜蛋白env基因的重组慢病毒质粒,并验证了其表达,为下一步慢病毒的包装以及细胞模型和动物模型的构建奠定了基础.
    목적 구건표체HIV-1포막단백ENV적만병독재체,감염인배신세포HEK293T,관찰env기인재HEK293T중적표체.방법 통과점돌변획득HIV-1 env완정기인,장env기인아극륭지만병독천사재체pLVX-IRES-ZsGreen1적EcoRⅠ、XhoⅠ위점,구건중조질립pLV-env,채용지질체전염법전염HEK293T,경RT-PCR、Western blot검측목적기인표체,동시이용격광공취초기술대env기인적표체진행료정위.결과 성공획득료HIV-1 env기인,구건료중조만병독질립pLV-env,RT-PCR、Western blot검측균표명외원기인능구표체,병구유항원성,동시env기인표체후가이분비도세포막표면막상.결론 성공구건료함유HIV-1포막단백env기인적중조만병독질립,병험증료기표체,위하일보만병독적포장이급세포모형화동물모형적구건전정료기출.
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