中国烟草学报
中國煙草學報
중국연초학보
ACTA TABACARIA SINICA
2012年
2期
33-36
,共4页
郭淼淼%种斌%徐小洪%杨超%陈海涛%蒋士君
郭淼淼%種斌%徐小洪%楊超%陳海濤%蔣士君
곽묘묘%충빈%서소홍%양초%진해도%장사군
青枯菌%土壤DNA%fliC%PCR检测
青枯菌%土壤DNA%fliC%PCR檢測
청고균%토양DNA%fliC%PCR검측
利用分子生物学手段,以R.solanacearum染色体上的16S rDNA ITS以及毒性质粒携带的致病性相关基因fliC为靶点,分别设计5对序列特异性引物,筛选得到了特异性扩增16SrDNA ITS保守序列的引物对RaITS-1/2以及特异性扩增病菌fliC基因片段的引物对RalfliC-F/R.比较这两对引物的扩增灵敏度、稳定性和特异性可以发现,它们均能够稳定、快速、灵敏地检测青枯菌DNA,检测灵敏度可以达到10 fg DNA/μL.在此基础上成功构建了直接检测土壤青枯菌DNA的PCR检测技术体系.
利用分子生物學手段,以R.solanacearum染色體上的16S rDNA ITS以及毒性質粒攜帶的緻病性相關基因fliC為靶點,分彆設計5對序列特異性引物,篩選得到瞭特異性擴增16SrDNA ITS保守序列的引物對RaITS-1/2以及特異性擴增病菌fliC基因片段的引物對RalfliC-F/R.比較這兩對引物的擴增靈敏度、穩定性和特異性可以髮現,它們均能夠穩定、快速、靈敏地檢測青枯菌DNA,檢測靈敏度可以達到10 fg DNA/μL.在此基礎上成功構建瞭直接檢測土壤青枯菌DNA的PCR檢測技術體繫.
이용분자생물학수단,이R.solanacearum염색체상적16S rDNA ITS이급독성질립휴대적치병성상관기인fliC위파점,분별설계5대서렬특이성인물,사선득도료특이성확증16SrDNA ITS보수서렬적인물대RaITS-1/2이급특이성확증병균fliC기인편단적인물대RalfliC-F/R.비교저량대인물적확증령민도、은정성화특이성가이발현,타문균능구은정、쾌속、령민지검측청고균DNA,검측령민도가이체도10 fg DNA/μL.재차기출상성공구건료직접검측토양청고균DNA적PCR검측기술체계.
