中华消化杂志
中華消化雜誌
중화소화잡지
Chinese Journal of Digestion
2007年
10期
662-665
,共4页
朱颖炜%林勇%张新%王要军%谢渭芬
硃穎煒%林勇%張新%王要軍%謝渭芬
주영위%림용%장신%왕요군%사위분
星形细胞%肝%RNA,小分子干扰%纤溶酶原激活物抑制剂-1
星形細胞%肝%RNA,小分子榦擾%纖溶酶原激活物抑製劑-1
성형세포%간%RNA,소분자간우%섬용매원격활물억제제-1
目的 研究化学合成纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)小干扰RNA(siRNA)对肝星状细胞(HSC)PAI-1基因表达及生物学特性的影响.方法 将化学合成抗PAI-1 siRNA以Lipofectamine包裹,转染HSC-T6细胞,设阴性对照和空白对照,抽提细胞总RNA及蛋白质,收集培养上清液,应用逆转录-聚合酶链反应和免疫细胞荧光法检测细胞PAI-1表达,应用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期变化,应用酶联免疫吸附法检测培养上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量.结果 转染siRNA的HSC-T6细胞PAI-1基因表达水平明显下调,HSC-T6细胞增殖抑制明显,48 h和72 h时培养上清液中Ⅰ型胶原表达水平显著减少,分别比阴性对照下降(20.71±8.40)%和(37.97±6.40)%(F=42.69,P=0.000 1),Ⅲ型胶原含量于72 h时降低(35.98±4.60)%(F=105.52,P=0.0001).结论 化学合成抗PAI-1 siRNA能高效抑制HSC-T6 PAI-1表达,抑制HSC-T6细胞增殖,显著减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成和分泌,具有预防及治疗肝纤维化的潜力.
目的 研究化學閤成纖溶酶原激活物抑製劑-1(PAI-1)小榦擾RNA(siRNA)對肝星狀細胞(HSC)PAI-1基因錶達及生物學特性的影響.方法 將化學閤成抗PAI-1 siRNA以Lipofectamine包裹,轉染HSC-T6細胞,設陰性對照和空白對照,抽提細胞總RNA及蛋白質,收集培養上清液,應用逆轉錄-聚閤酶鏈反應和免疫細胞熒光法檢測細胞PAI-1錶達,應用MTT法和流式細胞儀檢測細胞增殖和細胞週期變化,應用酶聯免疫吸附法檢測培養上清液中Ⅰ、Ⅲ型膠原含量.結果 轉染siRNA的HSC-T6細胞PAI-1基因錶達水平明顯下調,HSC-T6細胞增殖抑製明顯,48 h和72 h時培養上清液中Ⅰ型膠原錶達水平顯著減少,分彆比陰性對照下降(20.71±8.40)%和(37.97±6.40)%(F=42.69,P=0.000 1),Ⅲ型膠原含量于72 h時降低(35.98±4.60)%(F=105.52,P=0.0001).結論 化學閤成抗PAI-1 siRNA能高效抑製HSC-T6 PAI-1錶達,抑製HSC-T6細胞增殖,顯著減少Ⅰ、Ⅲ型膠原的閤成和分泌,具有預防及治療肝纖維化的潛力.
목적 연구화학합성섬용매원격활물억제제-1(PAI-1)소간우RNA(siRNA)대간성상세포(HSC)PAI-1기인표체급생물학특성적영향.방법 장화학합성항PAI-1 siRNA이Lipofectamine포과,전염HSC-T6세포,설음성대조화공백대조,추제세포총RNA급단백질,수집배양상청액,응용역전록-취합매련반응화면역세포형광법검측세포PAI-1표체,응용MTT법화류식세포의검측세포증식화세포주기변화,응용매련면역흡부법검측배양상청액중Ⅰ、Ⅲ형효원함량.결과 전염siRNA적HSC-T6세포PAI-1기인표체수평명현하조,HSC-T6세포증식억제명현,48 h화72 h시배양상청액중Ⅰ형효원표체수평현저감소,분별비음성대조하강(20.71±8.40)%화(37.97±6.40)%(F=42.69,P=0.000 1),Ⅲ형효원함량우72 h시강저(35.98±4.60)%(F=105.52,P=0.0001).결론 화학합성항PAI-1 siRNA능고효억제HSC-T6 PAI-1표체,억제HSC-T6세포증식,현저감소Ⅰ、Ⅲ형효원적합성화분비,구유예방급치료간섬유화적잠력.
