CAJ | 학술논문

将含有和不含前肽的豆豉溶栓酶编码序列在毕赤酵母中分别进行表达研究,发现在含有前肽的豆豉溶栓酶基因转化的毕赤酵母工程菌用甲醇诱导时,其培养液中可检测到较强的溶栓酶活性;而在不含前肽的豆豉溶栓酶基因转化的毕赤酵母菌用甲醇诱导时,培养液中未检测到溶栓酶活性.对毕赤酵母表达和分泌的豆豉溶栓酶进行了分离纯化,并对其纯化产物进行溶栓酶活性、SDS-PAGE电泳、抑制剂作用及免疫印迹分析.结果表明,分泌到培养液中的豆豉溶栓酶已经过剪切加工,其前肽已被切除,重组与天然的豆豉溶栓酶具有相同的溶栓酶活性,其所测定的各理化指标均一致.本研究实现了豆豉溶栓酶在毕赤酵母菌中成功表达,并首次直接证明了前肽对豆豉溶栓酶在毕赤酵母中分泌表达是必须的.图3表1参20
장함유화불함전태적두시용전매편마서렬재필적효모중분별진행표체연구,발현재함유전태적두시용전매기인전화적필적효모공정균용갑순유도시,기배양액중가검측도교강적용전매활성;이재불함전태적두시용전매기인전화적필적효모균용갑순유도시,배양액중미검측도용전매활성.대필적효모표체화분비적두시용전매진행료분리순화,병대기순화산물진행용전매활성、SDS-PAGE전영、억제제작용급면역인적분석.결과표명,분비도배양액중적두시용전매이경과전절가공,기전태이피절제,중조여천연적두시용전매구유상동적용전매활성,기소측정적각이화지표균일치.본연구실현료두시용전매재필적효모균중성공표체,병수차직접증명료전태대두시용전매재필적효모중분비표체시필수적.도3표1삼20