中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2006年
6期
545-550
,共6页
余自强%董宁征%白霞%沈飞%季顺东%邵波静%阮长耿
餘自彊%董寧徵%白霞%瀋飛%季順東%邵波靜%阮長耿
여자강%동저정%백하%침비%계순동%소파정%원장경
血小板%糖蛋白Ⅵ%胶原%单克隆抗体
血小闆%糖蛋白Ⅵ%膠原%單剋隆抗體
혈소판%당단백Ⅵ%효원%단극륭항체
目的:制备抗血小板糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)单克隆抗体,观察其在体外抗血小板黏附和聚集功能.方法:采用基因重组技术体外表达血小板糖蛋白Ⅵ胞外区重组蛋白(rGPⅥ).以rGPⅥ免疫小鼠,经细胞融合及筛选后制备抗GPⅥ单克隆抗体.采用血小板聚集实验观察该单抗对胶原、Convulxin及ADP诱导的血小板聚集的影响;利用平行板流动小室技术研究在高剪切力条件下该单抗对血小板在胶原表面黏附的抑制效果.结果:正确构建了rGPⅥ表达载体pET-20b(+)-GPⅥ,rGPⅥ在原核细胞中有效表达.rGPⅥ能够被抗Penta-His单抗和抗GPⅥ多抗识别.制备的抗GPⅥ单克隆抗体SZ118能够识别rGPⅥ,并与血小板有特异的结合能力.SZ118能明显抑制纤维状胶原和Convulxin诱导的血小板聚集,呈抗体剂量依赖性;对ADP诱导的血小板聚集无明显影响.血小板黏附实验表明,SZ118能够明显阻断在高剪切力条件下血小板与纤维状胶原表面的黏附.结论:成功制备抗GPⅥ单克隆抗体SZ118,该抗体与血小板有良好的结合能力,显著抑制胶原诱导的血小板聚集并明显降低血小板与胶原的黏附反应.
目的:製備抗血小闆糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)單剋隆抗體,觀察其在體外抗血小闆黏附和聚集功能.方法:採用基因重組技術體外錶達血小闆糖蛋白Ⅵ胞外區重組蛋白(rGPⅥ).以rGPⅥ免疫小鼠,經細胞融閤及篩選後製備抗GPⅥ單剋隆抗體.採用血小闆聚集實驗觀察該單抗對膠原、Convulxin及ADP誘導的血小闆聚集的影響;利用平行闆流動小室技術研究在高剪切力條件下該單抗對血小闆在膠原錶麵黏附的抑製效果.結果:正確構建瞭rGPⅥ錶達載體pET-20b(+)-GPⅥ,rGPⅥ在原覈細胞中有效錶達.rGPⅥ能夠被抗Penta-His單抗和抗GPⅥ多抗識彆.製備的抗GPⅥ單剋隆抗體SZ118能夠識彆rGPⅥ,併與血小闆有特異的結閤能力.SZ118能明顯抑製纖維狀膠原和Convulxin誘導的血小闆聚集,呈抗體劑量依賴性;對ADP誘導的血小闆聚集無明顯影響.血小闆黏附實驗錶明,SZ118能夠明顯阻斷在高剪切力條件下血小闆與纖維狀膠原錶麵的黏附.結論:成功製備抗GPⅥ單剋隆抗體SZ118,該抗體與血小闆有良好的結閤能力,顯著抑製膠原誘導的血小闆聚集併明顯降低血小闆與膠原的黏附反應.
목적:제비항혈소판당단백Ⅵ(GPⅥ)단극륭항체,관찰기재체외항혈소판점부화취집공능.방법:채용기인중조기술체외표체혈소판당단백Ⅵ포외구중조단백(rGPⅥ).이rGPⅥ면역소서,경세포융합급사선후제비항GPⅥ단극륭항체.채용혈소판취집실험관찰해단항대효원、Convulxin급ADP유도적혈소판취집적영향;이용평행판류동소실기술연구재고전절력조건하해단항대혈소판재효원표면점부적억제효과.결과:정학구건료rGPⅥ표체재체pET-20b(+)-GPⅥ,rGPⅥ재원핵세포중유효표체.rGPⅥ능구피항Penta-His단항화항GPⅥ다항식별.제비적항GPⅥ단극륭항체SZ118능구식별rGPⅥ,병여혈소판유특이적결합능력.SZ118능명현억제섬유상효원화Convulxin유도적혈소판취집,정항체제량의뢰성;대ADP유도적혈소판취집무명현영향.혈소판점부실험표명,SZ118능구명현조단재고전절력조건하혈소판여섬유상효원표면적점부.결론:성공제비항GPⅥ단극륭항체SZ118,해항체여혈소판유량호적결합능력,현저억제효원유도적혈소판취집병명현강저혈소판여효원적점부반응.
