畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2008年
9期
1245-1250
,共6页
潘群兴%何孔旺%王永山%温立斌%茅爱华%郭容利
潘群興%何孔旺%王永山%溫立斌%茅愛華%郭容利
반군흥%하공왕%왕영산%온립빈%모애화%곽용리
猪细小病毒%猪圆环病毒2型%嵌合%病毒样颗粒
豬細小病毒%豬圓環病毒2型%嵌閤%病毒樣顆粒
저세소병독%저원배병독2형%감합%병독양과립
将猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白第165-200位氨基酸多肽基因嵌合在猪细小病毒(PPV)VP2 N 端,然后重组到腺病毒pAdEasy-1表达系统中,转染HEK-293A细胞,获得重组腺病毒(rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap).IFA和Western blotting分析分别可见特异性荧光和大小约为64 ku的特异性带,表明rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap在HEK-293细胞中成功地表达了PPV:VP2 和PCV2:Cap蛋白.红细胞凝集试验证实,表达的嵌合PPV:VP2-PCV2:Cap蛋白具有与PPV全病毒类似的血凝活性.电镜观察嵌合PPV:VP2-PCV:Cap蛋白的粗提物,发现可自行装配成许多病毒样粒子[PPV:VLP(PCV2)].
將豬圓環病毒2型(PCV2)Cap蛋白第165-200位氨基痠多肽基因嵌閤在豬細小病毒(PPV)VP2 N 耑,然後重組到腺病毒pAdEasy-1錶達繫統中,轉染HEK-293A細胞,穫得重組腺病毒(rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap).IFA和Western blotting分析分彆可見特異性熒光和大小約為64 ku的特異性帶,錶明rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap在HEK-293細胞中成功地錶達瞭PPV:VP2 和PCV2:Cap蛋白.紅細胞凝集試驗證實,錶達的嵌閤PPV:VP2-PCV2:Cap蛋白具有與PPV全病毒類似的血凝活性.電鏡觀察嵌閤PPV:VP2-PCV:Cap蛋白的粗提物,髮現可自行裝配成許多病毒樣粒子[PPV:VLP(PCV2)].
장저원배병독2형(PCV2)Cap단백제165-200위안기산다태기인감합재저세소병독(PPV)VP2 N 단,연후중조도선병독pAdEasy-1표체계통중,전염HEK-293A세포,획득중조선병독(rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap).IFA화Western blotting분석분별가견특이성형광화대소약위64 ku적특이성대,표명rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap재HEK-293세포중성공지표체료PPV:VP2 화PCV2:Cap단백.홍세포응집시험증실,표체적감합PPV:VP2-PCV2:Cap단백구유여PPV전병독유사적혈응활성.전경관찰감합PPV:VP2-PCV:Cap단백적조제물,발현가자행장배성허다병독양입자[PPV:VLP(PCV2)].
