生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2009年
5期
601-607
,共7页
裴新辉%池姗%王尽淘%林志新%张雪洪%耿建国
裴新輝%池姍%王儘淘%林誌新%張雪洪%耿建國
배신휘%지산%왕진도%림지신%장설홍%경건국
小鼠组纵因子%昆虫杆状病毒%昆虫细胞Sf9%功能阻断性单克隆抗体
小鼠組縱因子%昆蟲桿狀病毒%昆蟲細胞Sf9%功能阻斷性單剋隆抗體
소서조종인자%곤충간상병독%곤충세포Sf9%공능조단성단극륭항체
组织因子是一种位于细胞膜上的糖蛋白,是外源性凝血过程的关键启动因子,近年来其在肿瘤细胞迁移等其他过程中的重要作用也已逐渐被揭示.构建了融合有His标签的小鼠组织因子胞外区段重组蛋白基因,利用昆虫杆状病毒蛋白表达系统成功表达并得到大量可溶性重组小鼠组织因子.利用血浆凝集实验和鼠尾流血时间实验对此重组小鼠组织因子进行的活性检测表明,此重组蛋白具有良好的生物活性,可以引起血浆凝血或缩短鼠尾流血时间.同时,利用此重组蛋白为抗原,制备了小鼠组纵因子的小鼠源功能阻断性单克隆抗体,在血浆凝集实验中证明其对小鼠组织因子的活性有明显抑制作用.利用此阻断性单抗,成功地在小鼠深静脉血栓模型中减轻了血栓形成,证明组织因子在深静脉血栓的病程发展中起重要作用,这也是组织因子组断性单抗在此类动物模型中的首次成功应用.通过此项工作,成功地建立了大最制备具有良好生物活性的重组小鼠组织因子蛋白的方法,并进而得到了小鼠组织因子功能阻断性单抗,为利用各种小鼠动物模型对组织因子在各项生命活动中的作用进行深入研究奠定了良好的基础.
組織因子是一種位于細胞膜上的糖蛋白,是外源性凝血過程的關鍵啟動因子,近年來其在腫瘤細胞遷移等其他過程中的重要作用也已逐漸被揭示.構建瞭融閤有His標籤的小鼠組織因子胞外區段重組蛋白基因,利用昆蟲桿狀病毒蛋白錶達繫統成功錶達併得到大量可溶性重組小鼠組織因子.利用血漿凝集實驗和鼠尾流血時間實驗對此重組小鼠組織因子進行的活性檢測錶明,此重組蛋白具有良好的生物活性,可以引起血漿凝血或縮短鼠尾流血時間.同時,利用此重組蛋白為抗原,製備瞭小鼠組縱因子的小鼠源功能阻斷性單剋隆抗體,在血漿凝集實驗中證明其對小鼠組織因子的活性有明顯抑製作用.利用此阻斷性單抗,成功地在小鼠深靜脈血栓模型中減輕瞭血栓形成,證明組織因子在深靜脈血栓的病程髮展中起重要作用,這也是組織因子組斷性單抗在此類動物模型中的首次成功應用.通過此項工作,成功地建立瞭大最製備具有良好生物活性的重組小鼠組織因子蛋白的方法,併進而得到瞭小鼠組織因子功能阻斷性單抗,為利用各種小鼠動物模型對組織因子在各項生命活動中的作用進行深入研究奠定瞭良好的基礎.
조직인자시일충위우세포막상적당단백,시외원성응혈과정적관건계동인자,근년래기재종류세포천이등기타과정중적중요작용야이축점피게시.구건료융합유His표첨적소서조직인자포외구단중조단백기인,이용곤충간상병독단백표체계통성공표체병득도대량가용성중조소서조직인자.이용혈장응집실험화서미류혈시간실험대차중조소서조직인자진행적활성검측표명,차중조단백구유량호적생물활성,가이인기혈장응혈혹축단서미류혈시간.동시,이용차중조단백위항원,제비료소서조종인자적소서원공능조단성단극륭항체,재혈장응집실험중증명기대소서조직인자적활성유명현억제작용.이용차조단성단항,성공지재소서심정맥혈전모형중감경료혈전형성,증명조직인자재심정맥혈전적병정발전중기중요작용,저야시조직인자조단성단항재차류동물모형중적수차성공응용.통과차항공작,성공지건립료대최제비구유량호생물활성적중조소서조직인자단백적방법,병진이득도료소서조직인자공능조단성단항,위이용각충소서동물모형대조직인자재각항생명활동중적작용진행심입연구전정료량호적기출.
