CAJ | 학술논문

表达去除SD0803 E2基因跨膜疏水区的sE2蛋白并制备其抗体,为猪源BVDV诊断奠定基础.RT-PCR扩增SD0803株sE2基因,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-sE2,转化BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔制备多克隆抗体.采用间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光等方法鉴定获得的抗体.结果显示,抗体效价最高可达1∶256 000;制备的抗体可与rsE2蛋白特异性结合；该抗体可特异性识别BVDV感染MDBK细胞表达的E2蛋白,显示抗体高度的特异性.成功构建pGEX-4T-1-sE2原核表达质粒,诱导其表达的蛋白免疫家兔,成功制备的猪源BVDV SD0803株E2抗体.
표체거제SD0803 E2기인과막소수구적sE2단백병제비기항체,위저원BVDV진단전정기출.RT-PCR확증SD0803주sE2기인,구건중조원핵표체재체pGEX-4T-1-sE2,전화BL21(DE3),IPTG유도단백표체,이순화적중조단백위항원면역가토제비다극륭항체.채용간접ELISA、Western blot、간접면역형광등방법감정획득적항체.결과현시,항체효개최고가체1∶256 000;제비적항체가여rsE2단백특이성결합；해항체가특이성식별BVDV감염MDBK세포표체적E2단백,현시항체고도적특이성.성공구건pGEX-4T-1-sE2원핵표체질립,유도기표체적단백면역가토,성공제비적저원BVDV SD0803주E2항체.