CAJ | 학술논문

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c-Jun对硫氧还蛋白还原酶1启动子转录的调控作用
c-Jun대류양환단백환원매1계동자전록적조공작용
c-Jun positively regulates transcription of thioredoxin reductase 1 gene through direct binding to its promoter

万方数据

中国病理生理杂志中國病理生理雜誌 중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年 4期 700-707 ,共8页

刘丽华%戚本玲%吴钦钦%李圆圆劉麗華%慼本玲%吳欽欽%李圓圓

류려화%척본령%오흠흠%리원원

硫氧还蛋白还原酶1%c-Jun%转录调控硫氧還蛋白還原酶1%c-Jun%轉錄調控
류양환단백환원매1%c-Jun%전록조공

目的:探讨转录因子激活剂蛋白-1(activator protein-1,AP-1)家族成员c-Jun对硫氧还蛋白还原酶1(thioredoxin reductase 1,TrxR1)启动子转录的调控作用.方法:利用生物信息学技术分析调控TrxR1启动子区域的转录因子,构建TrxR1启动子区域一系列截短的萤光素酶报告基因载体,将含c-Jun的真核表达载体pcDNA3.1(+)-c-Jun和含有TrxR1启动子的萤光素酶报告基因载体共转染人胚肾HEK293细胞和鼠心肌H9c2细胞,检测转染细胞中萤光素酶活性.应用定点突变技术针对TrxR1启动子区域AP-1的可能结合位点进行突变,与c-Jun的真核表达载体共转染上述2种细胞,检测各组萤光素酶活性.利用染色质免疫共沉淀(ChIP),分析c-Jun与TrxR1启动子区域的AP-1结合位点结合情况.结果:酶切及测序结果表明,获得的3个不同长度的TrxR1启动子克隆与GenBank DNA序列数据库对比分析序列一致,且插入方向正确;此3种质粒都有明显的启动子活性,在人胚肾HEK293和鼠心肌H9c2细胞中转染pcDNA 3.1(+)-c-Jun可以上调TrxR1启动子活性.突变AP-1结合位点,导致TrxR1启动子活性明显降低;ChIP结果显示c-Jun结合在TrxR1启动子区域的AP-1结合位点上.结论:转录因子AP-1家族成员c-Jun可能通过与TrxR1基因启动子区域AP-1结合位点相结合,上调TrxR1基因的转录.
목적:탐토전록인자격활제단백-1(activator protein-1,AP-1)가족성원c-Jun대류양환단백환원매1(thioredoxin reductase 1,TrxR1)계동자전록적조공작용.방법:이용생물신식학기술분석조공TrxR1계동자구역적전록인자,구건TrxR1계동자구역일계렬절단적형광소매보고기인재체,장함c-Jun적진핵표체재체pcDNA3.1(+)-c-Jun화함유TrxR1계동자적형광소매보고기인재체공전염인배신HEK293세포화서심기H9c2세포,검측전염세포중형광소매활성.응용정점돌변기술침대TrxR1계동자구역AP-1적가능결합위점진행돌변,여c-Jun적진핵표체재체공전염상술2충세포,검측각조형광소매활성.이용염색질면역공침정(ChIP),분석c-Jun여TrxR1계동자구역적AP-1결합위점결합정황.결과:매절급측서결과표명,획득적3개불동장도적TrxR1계동자극륭여GenBank DNA서렬수거고대비분석서렬일치,차삽입방향정학;차3충질립도유명현적계동자활성,재인배신HEK293화서심기H9c2세포중전염pcDNA 3.1(+)-c-Jun가이상조TrxR1계동자활성.돌변AP-1결합위점,도치TrxR1계동자활성명현강저;ChIP결과현시c-Jun결합재TrxR1계동자구역적AP-1결합위점상.결론:전록인자AP-1가족성원c-Jun가능통과여TrxR1기인계동자구역AP-1결합위점상결합,상조TrxR1기인적전록.