中华实验和临床病毒学杂志
中華實驗和臨床病毒學雜誌
중화실험화림상병독학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY
2005年
2期
114-117
,共4页
腺病毒科感染%基因,c-FLIPs%CD4淋巴细胞计数%T淋巴细胞%抗原,CD95%细胞凋亡
腺病毒科感染%基因,c-FLIPs%CD4淋巴細胞計數%T淋巴細胞%抗原,CD95%細胞凋亡
선병독과감염%기인,c-FLIPs%CD4림파세포계수%T림파세포%항원,CD95%세포조망
目的探讨表达c-FLIPs重组腺病毒诱导淋巴细胞抗凋亡作用.方法采用RT-PCR方法,从人T淋巴细胞株的总RNA中克隆c-FLIPs基因;通过pAdeasy系统,构建表达c-FLIPs的重组腺病毒Ad.c-FLIPs;Hochest染色法及PI染色流式细胞仪检测anti-Apo-1诱导感染Ad.c-FLIPs后的H9细胞凋亡.结果采用RT-PCR方法从人T淋巴细胞株中扩增出c-FLIPs基因;构建重组腺病毒Ad.c-FLIPs;经Hoechst染色,荧光显微镜下观察细胞核的形态,结果发现,经anti-Apo-1诱导凋亡处理24 h后,未经Ad.c-FLIPs感染的H9细胞有大量的细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞;Ad.c-FLIPs感染的H9细胞中细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数明显减少,大部分细胞染色质呈弥漫均匀低强度荧光;流式细胞仪分析经PI染色后的H9细胞,未经Ad.c-FLIPs预处理的H9细胞在anti-Apo-1作用24 h后,细胞的凋亡率分别为48.33%±7.41%;经Ad.c-FLIPs预处理1 d的H9细胞,其细胞凋亡率分别下降到3.60%±0.21%.结论重组腺病毒Ad.c-FLIPs可有效地诱导淋巴细胞的抗凋亡作用.
目的探討錶達c-FLIPs重組腺病毒誘導淋巴細胞抗凋亡作用.方法採用RT-PCR方法,從人T淋巴細胞株的總RNA中剋隆c-FLIPs基因;通過pAdeasy繫統,構建錶達c-FLIPs的重組腺病毒Ad.c-FLIPs;Hochest染色法及PI染色流式細胞儀檢測anti-Apo-1誘導感染Ad.c-FLIPs後的H9細胞凋亡.結果採用RT-PCR方法從人T淋巴細胞株中擴增齣c-FLIPs基因;構建重組腺病毒Ad.c-FLIPs;經Hoechst染色,熒光顯微鏡下觀察細胞覈的形態,結果髮現,經anti-Apo-1誘導凋亡處理24 h後,未經Ad.c-FLIPs感染的H9細胞有大量的細胞覈呈濃染緻密的固縮形態或顆粒狀熒光的凋亡細胞;Ad.c-FLIPs感染的H9細胞中細胞覈呈濃染緻密的固縮形態或顆粒狀熒光的細胞數明顯減少,大部分細胞染色質呈瀰漫均勻低彊度熒光;流式細胞儀分析經PI染色後的H9細胞,未經Ad.c-FLIPs預處理的H9細胞在anti-Apo-1作用24 h後,細胞的凋亡率分彆為48.33%±7.41%;經Ad.c-FLIPs預處理1 d的H9細胞,其細胞凋亡率分彆下降到3.60%±0.21%.結論重組腺病毒Ad.c-FLIPs可有效地誘導淋巴細胞的抗凋亡作用.
목적탐토표체c-FLIPs중조선병독유도림파세포항조망작용.방법채용RT-PCR방법,종인T림파세포주적총RNA중극륭c-FLIPs기인;통과pAdeasy계통,구건표체c-FLIPs적중조선병독Ad.c-FLIPs;Hochest염색법급PI염색류식세포의검측anti-Apo-1유도감염Ad.c-FLIPs후적H9세포조망.결과채용RT-PCR방법종인T림파세포주중확증출c-FLIPs기인;구건중조선병독Ad.c-FLIPs;경Hoechst염색,형광현미경하관찰세포핵적형태,결과발현,경anti-Apo-1유도조망처리24 h후,미경Ad.c-FLIPs감염적H9세포유대량적세포핵정농염치밀적고축형태혹과립상형광적조망세포;Ad.c-FLIPs감염적H9세포중세포핵정농염치밀적고축형태혹과립상형광적세포수명현감소,대부분세포염색질정미만균균저강도형광;류식세포의분석경PI염색후적H9세포,미경Ad.c-FLIPs예처리적H9세포재anti-Apo-1작용24 h후,세포적조망솔분별위48.33%±7.41%;경Ad.c-FLIPs예처리1 d적H9세포,기세포조망솔분별하강도3.60%±0.21%.결론중조선병독Ad.c-FLIPs가유효지유도림파세포적항조망작용.
