CAJ | 학술논문

建立应用长臂光敏生物素核酸探针和光敏地高辛核酸探针杂交.检测真菌的方法, 并比较二者检测临床常见医学真菌的敏感性.设计并合成医学真菌通用引物, 用PCR扩增白色念珠菌标准株的核糖体RNA基因, 用长臂光敏生物素或光敏地高辛标记其纯化的扩增产物制备成相应的核酸探针, 然后用上述两种探针对标本中的PCR扩增产物进行Southern杂交, 检测医学真菌.通过用白色念珠菌感染大鼠, 建立念珠菌病的实验动物模型, 验证血培养法、PCR法和PCR扩增结合Southern杂交, 检测真菌的敏感性.结果表明,这两种核酸探针可分别与白色念珠菌、热带念珠菌、新型隐球菌、黄曲霉菌、烟曲霉菌等9种真菌杂交呈阳性结果; 与临床常见的细菌、病毒和哺乳动物组织细胞DNA杂交结果为阴性.利用实验动物模型比较了血培养法、PCR法和PCR扩增结合长臂光敏生物素核酸探针Southern杂交法检测真菌血症的灵敏度, 实验证明后者的敏感性最高.总之, 应用长臂光敏生物素核酸探针和光敏地高辛核酸探针与标本PCR扩增物杂交, 检测上述真菌既特异和敏感, 又不需放射性同位素.光敏地高辛核酸探针检测医学真菌的灵敏度略高于长臂光敏生物素核酸探针.
건립응용장비광민생물소핵산탐침화광민지고신핵산탐침잡교.검측진균적방법, 병비교이자검측림상상견의학진균적민감성.설계병합성의학진균통용인물, 용PCR확증백색념주균표준주적핵당체RNA기인, 용장비광민생물소혹광민지고신표기기순화적확증산물제비성상응적핵산탐침, 연후용상술량충탐침대표본중적PCR확증산물진행Southern잡교, 검측의학진균.통과용백색념주균감염대서, 건립념주균병적실험동물모형, 험증혈배양법、PCR법화PCR확증결합Southern잡교, 검측진균적민감성.결과표명,저량충핵산탐침가분별여백색념주균、열대념주균、신형은구균、황곡매균、연곡매균등9충진균잡교정양성결과; 여림상상견적세균、병독화포유동물조직세포DNA잡교결과위음성.이용실험동물모형비교료혈배양법、PCR법화PCR확증결합장비광민생물소핵산탐침Southern잡교법검측진균혈증적령민도, 실험증명후자적민감성최고.총지, 응용장비광민생물소핵산탐침화광민지고신핵산탐침여표본PCR확증물잡교, 검측상술진균기특이화민감, 우불수방사성동위소.광민지고신핵산탐침검측의학진균적령민도략고우장비광민생물소핵산탐침.