武汉大学学报(理学版)
武漢大學學報(理學版)
무한대학학보(이학판)
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(Natural Science Edition)
2003年
4期
497-500
,共4页
贺石汉%李宝宗%郜金荣%叶林柏%郑永勋%佘应龙%吴正辉
賀石漢%李寶宗%郜金榮%葉林柏%鄭永勛%佘應龍%吳正輝
하석한%리보종%고금영%협림백%정영훈%사응룡%오정휘
tPAr%工程菌株%传代%遗传稳定性
tPAr%工程菌株%傳代%遺傳穩定性
tPAr%공정균주%전대%유전은정성
将构建好的含有人变异tPA基因的重组pQE30 tPAr质粒的JM109菌株原始种子库菌种,在含Amp的平板培养基划线法连续传代至100代,其在固体培养基中生长速度、菌落形态和菌体形态、Amp抗性等方面与原始种子库无明显差异;每隔10代提取质粒DNA用HindⅢ和KpnⅠ限制性内切酶切割检查,酶切图谱没有改变;DNA测序未见tPAr基因变异.用原代和第100代培养诱导表达tPAr,表达水平和tPAr活性均无明显差异.菌体的SDS-pAGE图谱也完全相同.以上结果表明所建立的JM109tPAr工程菌株具有良好的遗传稳定性.
將構建好的含有人變異tPA基因的重組pQE30 tPAr質粒的JM109菌株原始種子庫菌種,在含Amp的平闆培養基劃線法連續傳代至100代,其在固體培養基中生長速度、菌落形態和菌體形態、Amp抗性等方麵與原始種子庫無明顯差異;每隔10代提取質粒DNA用HindⅢ和KpnⅠ限製性內切酶切割檢查,酶切圖譜沒有改變;DNA測序未見tPAr基因變異.用原代和第100代培養誘導錶達tPAr,錶達水平和tPAr活性均無明顯差異.菌體的SDS-pAGE圖譜也完全相同.以上結果錶明所建立的JM109tPAr工程菌株具有良好的遺傳穩定性.
장구건호적함유인변이tPA기인적중조pQE30 tPAr질립적JM109균주원시충자고균충,재함Amp적평판배양기화선법련속전대지100대,기재고체배양기중생장속도、균락형태화균체형태、Amp항성등방면여원시충자고무명현차이;매격10대제취질립DNA용HindⅢ화KpnⅠ한제성내절매절할검사,매절도보몰유개변;DNA측서미견tPAr기인변이.용원대화제100대배양유도표체tPAr,표체수평화tPAr활성균무명현차이.균체적SDS-pAGE도보야완전상동.이상결과표명소건립적JM109tPAr공정균주구유량호적유전은정성.
