免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2004年
5期
393-396
,共4页
人乳头瘤病毒16型%子宫颈癌%免疫球蛋白G%重组蛋白
人乳頭瘤病毒16型%子宮頸癌%免疫毬蛋白G%重組蛋白
인유두류병독16형%자궁경암%면역구단백G%중조단백
目的将人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus type 16,HPV-16)的晚期表达蛋白E7上的抗原24肽(从第38位氨基酸到第61位氨基酸)与人免疫球蛋白G的重链恒定区融合表达,并以此融合蛋白作为抗原,可能为HPV-16病毒感染防治提供免疫治疗方法.方法利用PCR方法分别扩增HPV-16 E7(38-61)24肽的DNA片段和人免疫球蛋白G的重链恒定区DNA片段,并构建到pET21a表达载体上,转化入E.coli中表达,利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质免疫印迹(Western-blotting)的方法对表达结果进行鉴定.结果构建的表达载体HPV16E7e/hIgGHCCR-pET21a经酶切鉴定和测序显示序列正确;通过SDS-PAGE和Western-blotting的鉴定,重组融合蛋白Mr约40 000,表达量可占菌体蛋白的20%左右.结论成功构建HPV16-E7的抗原多肽片段和人免疫球蛋白G的重链恒定区的融合蛋白,并可在E.coli中高效表达.
目的將人乳頭瘤病毒16型(Human papillomavirus type 16,HPV-16)的晚期錶達蛋白E7上的抗原24肽(從第38位氨基痠到第61位氨基痠)與人免疫毬蛋白G的重鏈恆定區融閤錶達,併以此融閤蛋白作為抗原,可能為HPV-16病毒感染防治提供免疫治療方法.方法利用PCR方法分彆擴增HPV-16 E7(38-61)24肽的DNA片段和人免疫毬蛋白G的重鏈恆定區DNA片段,併構建到pET21a錶達載體上,轉化入E.coli中錶達,利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和蛋白質免疫印跡(Western-blotting)的方法對錶達結果進行鑒定.結果構建的錶達載體HPV16E7e/hIgGHCCR-pET21a經酶切鑒定和測序顯示序列正確;通過SDS-PAGE和Western-blotting的鑒定,重組融閤蛋白Mr約40 000,錶達量可佔菌體蛋白的20%左右.結論成功構建HPV16-E7的抗原多肽片段和人免疫毬蛋白G的重鏈恆定區的融閤蛋白,併可在E.coli中高效錶達.
목적장인유두류병독16형(Human papillomavirus type 16,HPV-16)적만기표체단백E7상적항원24태(종제38위안기산도제61위안기산)여인면역구단백G적중련항정구융합표체,병이차융합단백작위항원,가능위HPV-16병독감염방치제공면역치료방법.방법이용PCR방법분별확증HPV-16 E7(38-61)24태적DNA편단화인면역구단백G적중련항정구DNA편단,병구건도pET21a표체재체상,전화입E.coli중표체,이용SDS-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)화단백질면역인적(Western-blotting)적방법대표체결과진행감정.결과구건적표체재체HPV16E7e/hIgGHCCR-pET21a경매절감정화측서현시서렬정학;통과SDS-PAGE화Western-blotting적감정,중조융합단백Mr약40 000,표체량가점균체단백적20%좌우.결론성공구건HPV16-E7적항원다태편단화인면역구단백G적중련항정구적융합단백,병가재E.coli중고효표체.
