食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2006年
12期
473-478
,共6页
胡忠%吴奕瑞%林键%庄东红
鬍忠%吳奕瑞%林鍵%莊東紅
호충%오혁서%림건%장동홍
枯草芽孢杆菌%纳豆激酶%基因克隆与表达
枯草芽孢桿菌%納豆激酶%基因剋隆與錶達
고초아포간균%납두격매%기인극륭여표체
从市售的纳豆制品中分离并纯化出一株具有高效纤溶活性的菌株ND2,经生理生化特性及16srRNA序列分析鉴定为芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌.通过正交试验优化菌株ND2的发酵条件,得到ND2产纳豆激酶的最佳条件:氮源-大豆蛋白胨,碳源-淀粉,碳氮比3∶1,37 ℃,pH6.0.经PCR扩增得到825 bp的纳豆激酶成熟肽基因,采用pET32a(+)表达载体和BL21(DE3)为宿主菌,在温度为37 ℃、1‰IPTG浓度下可诱导获得较高表达量的重组纳豆激酶.
從市售的納豆製品中分離併純化齣一株具有高效纖溶活性的菌株ND2,經生理生化特性及16srRNA序列分析鑒定為芽孢桿菌屬的枯草芽孢桿菌.通過正交試驗優化菌株ND2的髮酵條件,得到ND2產納豆激酶的最佳條件:氮源-大豆蛋白胨,碳源-澱粉,碳氮比3∶1,37 ℃,pH6.0.經PCR擴增得到825 bp的納豆激酶成熟肽基因,採用pET32a(+)錶達載體和BL21(DE3)為宿主菌,在溫度為37 ℃、1‰IPTG濃度下可誘導穫得較高錶達量的重組納豆激酶.
종시수적납두제품중분리병순화출일주구유고효섬용활성적균주ND2,경생리생화특성급16srRNA서렬분석감정위아포간균속적고초아포간균.통과정교시험우화균주ND2적발효조건,득도ND2산납두격매적최가조건:담원-대두단백동,탄원-정분,탄담비3∶1,37 ℃,pH6.0.경PCR확증득도825 bp적납두격매성숙태기인,채용pET32a(+)표체재체화BL21(DE3)위숙주균,재온도위37 ℃、1‰IPTG농도하가유도획득교고표체량적중조납두격매.
