第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2006年
19期
1729-1732
,共4页
程欣%王立峰%张健%刘娜%苏金%于江天%刘新平
程訢%王立峰%張健%劉娜%囌金%于江天%劉新平
정흔%왕립봉%장건%류나%소금%우강천%류신평
NF-κB%p65%IκBα%类风湿性关节炎%逆转录聚合酶链反应
NF-κB%p65%IκBα%類風濕性關節炎%逆轉錄聚閤酶鏈反應
NF-κB%p65%IκBα%류풍습성관절염%역전록취합매련반응
目的: 构建人p65和IκBα基因的真核表达载体并检测其在人永生化滑膜细胞MH7a中的表达. 方法: 应用RT-PCR方法从体外培养的HEK293细胞mRNA中扩增出p65和IκBα基因的编码区,克隆至pMD18T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1myc/His(-)A,酶切鉴定正确后以脂质体法瞬时转染MH7a细胞,Western Blot检测p65和IκBα的表达. 结果: 测序证实PCR扩增得到的p65和IκBα基因编码区序列正确;脂质体法转染MH7a细胞后检测到预期目的蛋白的表达. 结论: 成功构建了p65和IκBα的真核表达载体并使其在人永生化滑膜细胞中表达.
目的: 構建人p65和IκBα基因的真覈錶達載體併檢測其在人永生化滑膜細胞MH7a中的錶達. 方法: 應用RT-PCR方法從體外培養的HEK293細胞mRNA中擴增齣p65和IκBα基因的編碼區,剋隆至pMD18T載體併測序,然後亞剋隆至真覈錶達載體pcDNA3.1myc/His(-)A,酶切鑒定正確後以脂質體法瞬時轉染MH7a細胞,Western Blot檢測p65和IκBα的錶達. 結果: 測序證實PCR擴增得到的p65和IκBα基因編碼區序列正確;脂質體法轉染MH7a細胞後檢測到預期目的蛋白的錶達. 結論: 成功構建瞭p65和IκBα的真覈錶達載體併使其在人永生化滑膜細胞中錶達.
목적: 구건인p65화IκBα기인적진핵표체재체병검측기재인영생화활막세포MH7a중적표체. 방법: 응용RT-PCR방법종체외배양적HEK293세포mRNA중확증출p65화IκBα기인적편마구,극륭지pMD18T재체병측서,연후아극륭지진핵표체재체pcDNA3.1myc/His(-)A,매절감정정학후이지질체법순시전염MH7a세포,Western Blot검측p65화IκBα적표체. 결과: 측서증실PCR확증득도적p65화IκBα기인편마구서렬정학;지질체법전염MH7a세포후검측도예기목적단백적표체. 결론: 성공구건료p65화IκBα적진핵표체재체병사기재인영생화활막세포중표체.
