世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2007年
14期
1583-1590
,共8页
李学东%傅华群%李少华%尚西亮%邢宏松%胡鹏
李學東%傅華群%李少華%尚西亮%邢宏鬆%鬍鵬
리학동%부화군%리소화%상서량%형굉송%호붕
大鼠%肝卵圆细胞%缝隙连接蛋白%缝隙连接细胞间通讯%免疫组化%逆转录-聚合酶链反应%免疫印迹%切开标记/染料示踪技术
大鼠%肝卵圓細胞%縫隙連接蛋白%縫隙連接細胞間通訊%免疫組化%逆轉錄-聚閤酶鏈反應%免疫印跡%切開標記/染料示蹤技術
대서%간란원세포%봉극련접단백%봉극련접세포간통신%면역조화%역전록-취합매련반응%면역인적%절개표기/염료시종기술
目的:研究肝脏缝隙连接细胞间通讯(GJIC)对大鼠体内肝卵圆细胞(HOC)增殖的影响.方法:健康♂Wistar大鼠,随机分成对照组(n=6)、模型组、苯巴比妥(Phenobarbital,PB)组.模型组大鼠按每天20 mg/kg剂量灌喂2-AFF,连续4 d,第5天不灌喂行2/3肝切除,术后次日按每天20 mg/kg剂量继续灌喂5 d(2-AFF/PH);PB组予以0.8 g/L PB饮水7 d,第8天按模型组处理,0.8 g/L PB饮水持续至实验结束.模型组、PB组在术后4 h,4,8,12和16 d随机取6只大鼠检测.采用组织病理技术观察肝组织的形态学变化;免疫组化和细胞形态学方法计数HOC;切开标记/染料示踪技术(incision loading/dye transfer,IL/DT)技术确定GJIC;免疫组化及RT-PCR技术检测CX32蛋白及mRNA表达;免疫组化、Western blot及RT-PCR技术分析CX43蛋白及mRNA水平.结果:对照组及模型组和PB组4 h未见HOC增殖.模型组4 d汇管区有HOC增殖反应,8 d HOC增殖达峰值,12 d HOC从汇管区向肝实质内浸润,16 d HOC增殖较12 d减少.与模型组比较PB组4-16 d各时点HOC明显增加(P＜0.01);IL/DT显示各时点模型组大鼠肝脏GJIC均低于对照组(P＜0.01),与模型组比较PB组各时点GJIC进一步降低(P＜0.01);模型组、PB组各时点CX32的表达低于对照组(P＜0.05),与模型组比较PB组CX32表达在4 h,12,16 d时点减少(P＜0.05),在4,8 d时点表达增多(P＜0.05);模型组4 h-16 d时点CX32 mRNA水平分别为对照组的0.82±0.13,0.33±0.11,0.51±0.13,0.68±0.14,1.12±0.18倍,与模型组比较PB组4 h时点无显著差异(P＞0.05),4-16 d时点明显升高(P＜0.05).模型组4 h-16 d各时点CX43蛋白表达分别为对照组的1.14±0.17,3.87±0.35,5.28±0.48,2.96±0.33,2.12±0.19倍,与模型组比较PB组CX43蛋白4 h上调(P＞0.05),4-16 d明显减少(P＜0.05).模型组4 h-16 d各时点CX43 mRNA水平分别为对照组的1.09±0.16,2.82±0.23,5.46±0.58,3.34±0.64,0.91±0.11倍.与模型组比较PB组各时点CX43 mRNA表达上调(P＜0.05).结论:改变大鼠2-AAF/PH模型肝脏CX32、CX43的时空表达模式,降低肝脏肝细胞及HOC与其偶联细胞的GJIC,可解除HOC生长抑制,促进HOC的增殖.
目的:研究肝髒縫隙連接細胞間通訊(GJIC)對大鼠體內肝卵圓細胞(HOC)增殖的影響.方法:健康♂Wistar大鼠,隨機分成對照組(n=6)、模型組、苯巴比妥(Phenobarbital,PB)組.模型組大鼠按每天20 mg/kg劑量灌餵2-AFF,連續4 d,第5天不灌餵行2/3肝切除,術後次日按每天20 mg/kg劑量繼續灌餵5 d(2-AFF/PH);PB組予以0.8 g/L PB飲水7 d,第8天按模型組處理,0.8 g/L PB飲水持續至實驗結束.模型組、PB組在術後4 h,4,8,12和16 d隨機取6隻大鼠檢測.採用組織病理技術觀察肝組織的形態學變化;免疫組化和細胞形態學方法計數HOC;切開標記/染料示蹤技術(incision loading/dye transfer,IL/DT)技術確定GJIC;免疫組化及RT-PCR技術檢測CX32蛋白及mRNA錶達;免疫組化、Western blot及RT-PCR技術分析CX43蛋白及mRNA水平.結果:對照組及模型組和PB組4 h未見HOC增殖.模型組4 d彙管區有HOC增殖反應,8 d HOC增殖達峰值,12 d HOC從彙管區嚮肝實質內浸潤,16 d HOC增殖較12 d減少.與模型組比較PB組4-16 d各時點HOC明顯增加(P＜0.01);IL/DT顯示各時點模型組大鼠肝髒GJIC均低于對照組(P＜0.01),與模型組比較PB組各時點GJIC進一步降低(P＜0.01);模型組、PB組各時點CX32的錶達低于對照組(P＜0.05),與模型組比較PB組CX32錶達在4 h,12,16 d時點減少(P＜0.05),在4,8 d時點錶達增多(P＜0.05);模型組4 h-16 d時點CX32 mRNA水平分彆為對照組的0.82±0.13,0.33±0.11,0.51±0.13,0.68±0.14,1.12±0.18倍,與模型組比較PB組4 h時點無顯著差異(P＞0.05),4-16 d時點明顯升高(P＜0.05).模型組4 h-16 d各時點CX43蛋白錶達分彆為對照組的1.14±0.17,3.87±0.35,5.28±0.48,2.96±0.33,2.12±0.19倍,與模型組比較PB組CX43蛋白4 h上調(P＞0.05),4-16 d明顯減少(P＜0.05).模型組4 h-16 d各時點CX43 mRNA水平分彆為對照組的1.09±0.16,2.82±0.23,5.46±0.58,3.34±0.64,0.91±0.11倍.與模型組比較PB組各時點CX43 mRNA錶達上調(P＜0.05).結論:改變大鼠2-AAF/PH模型肝髒CX32、CX43的時空錶達模式,降低肝髒肝細胞及HOC與其偶聯細胞的GJIC,可解除HOC生長抑製,促進HOC的增殖.
목적:연구간장봉극련접세포간통신(GJIC)대대서체내간란원세포(HOC)증식적영향.방법:건강♂Wistar대서,수궤분성대조조(n=6)、모형조、분파비타(Phenobarbital,PB)조.모형조대서안매천20 mg/kg제량관위2-AFF,련속4 d,제5천불관위행2/3간절제,술후차일안매천20 mg/kg제량계속관위5 d(2-AFF/PH);PB조여이0.8 g/L PB음수7 d,제8천안모형조처리,0.8 g/L PB음수지속지실험결속.모형조、PB조재술후4 h,4,8,12화16 d수궤취6지대서검측.채용조직병리기술관찰간조직적형태학변화;면역조화화세포형태학방법계수HOC;절개표기/염료시종기술(incision loading/dye transfer,IL/DT)기술학정GJIC;면역조화급RT-PCR기술검측CX32단백급mRNA표체;면역조화、Western blot급RT-PCR기술분석CX43단백급mRNA수평.결과:대조조급모형조화PB조4 h미견HOC증식.모형조4 d회관구유HOC증식반응,8 d HOC증식체봉치,12 d HOC종회관구향간실질내침윤,16 d HOC증식교12 d감소.여모형조비교PB조4-16 d각시점HOC명현증가(P＜0.01);IL/DT현시각시점모형조대서간장GJIC균저우대조조(P＜0.01),여모형조비교PB조각시점GJIC진일보강저(P＜0.01);모형조、PB조각시점CX32적표체저우대조조(P＜0.05),여모형조비교PB조CX32표체재4 h,12,16 d시점감소(P＜0.05),재4,8 d시점표체증다(P＜0.05);모형조4 h-16 d시점CX32 mRNA수평분별위대조조적0.82±0.13,0.33±0.11,0.51±0.13,0.68±0.14,1.12±0.18배,여모형조비교PB조4 h시점무현저차이(P＞0.05),4-16 d시점명현승고(P＜0.05).모형조4 h-16 d각시점CX43단백표체분별위대조조적1.14±0.17,3.87±0.35,5.28±0.48,2.96±0.33,2.12±0.19배,여모형조비교PB조CX43단백4 h상조(P＞0.05),4-16 d명현감소(P＜0.05).모형조4 h-16 d각시점CX43 mRNA수평분별위대조조적1.09±0.16,2.82±0.23,5.46±0.58,3.34±0.64,0.91±0.11배.여모형조비교PB조각시점CX43 mRNA표체상조(P＜0.05).결론:개변대서2-AAF/PH모형간장CX32、CX43적시공표체모식,강저간장간세포급HOC여기우련세포적GJIC,가해제HOC생장억제,촉진HOC적증식.
