首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2011年
4期
519-524
,共6页
闫韶飞%文朝阳%高尔静%牛静%郑少鹏%丁卫
閆韶飛%文朝暘%高爾靜%牛靜%鄭少鵬%丁衛
염소비%문조양%고이정%우정%정소붕%정위
腺相关病毒%RAB蛋白%囊泡运输%呼吸道上皮细胞
腺相關病毒%RAB蛋白%囊泡運輸%呼吸道上皮細胞
선상관병독%RAB단백%낭포운수%호흡도상피세포
确认Ⅱ型腺相关病毒（adeno-associated virus,AAV2）是否能够在肺上皮细胞中经过囊泡分选过程进入晚期内体,并且进一步检测在内体中分离的腺相关病毒是否具有不同的转导活性,从而探讨内体转运系统在腺相关病毒感染动力学中的作用.方法以RAB7的GFP融合蛋白作为晚期内体的特异性标记,通过对Ⅱ型腺相关病毒进行荧光标记,在人支气管上皮转化细胞IB3中进行共聚焦显微成像的共定位分析.通过密度梯度离心和内体亲和沉淀对进入细胞内体的病毒颗粒进行分离,并对细胞进行二次感染时的活性在有或无RAB7影响因素的条件下进行比较分析.结果相当部分的Ⅱ型腺相关病毒在感染IB3细胞后能够进入晚期内体且进入晚期内体的病毒比未经细胞分选的病毒表现出更好的外源基因表达活性.结论提示Ⅱ型腺相关病毒在肺支气管上皮细胞中晚期内体的转运可能促进其转导的活化过程.
確認Ⅱ型腺相關病毒（adeno-associated virus,AAV2）是否能夠在肺上皮細胞中經過囊泡分選過程進入晚期內體,併且進一步檢測在內體中分離的腺相關病毒是否具有不同的轉導活性,從而探討內體轉運繫統在腺相關病毒感染動力學中的作用.方法以RAB7的GFP融閤蛋白作為晚期內體的特異性標記,通過對Ⅱ型腺相關病毒進行熒光標記,在人支氣管上皮轉化細胞IB3中進行共聚焦顯微成像的共定位分析.通過密度梯度離心和內體親和沉澱對進入細胞內體的病毒顆粒進行分離,併對細胞進行二次感染時的活性在有或無RAB7影響因素的條件下進行比較分析.結果相噹部分的Ⅱ型腺相關病毒在感染IB3細胞後能夠進入晚期內體且進入晚期內體的病毒比未經細胞分選的病毒錶現齣更好的外源基因錶達活性.結論提示Ⅱ型腺相關病毒在肺支氣管上皮細胞中晚期內體的轉運可能促進其轉導的活化過程.
학인Ⅱ형선상관병독（adeno-associated virus,AAV2）시부능구재폐상피세포중경과낭포분선과정진입만기내체,병차진일보검측재내체중분리적선상관병독시부구유불동적전도활성,종이탐토내체전운계통재선상관병독감염동역학중적작용.방법이RAB7적GFP융합단백작위만기내체적특이성표기,통과대Ⅱ형선상관병독진행형광표기,재인지기관상피전화세포IB3중진행공취초현미성상적공정위분석.통과밀도제도리심화내체친화침정대진입세포내체적병독과립진행분리,병대세포진행이차감염시적활성재유혹무RAB7영향인소적조건하진행비교분석.결과상당부분적Ⅱ형선상관병독재감염IB3세포후능구진입만기내체차진입만기내체적병독비미경세포분선적병독표현출경호적외원기인표체활성.결론제시Ⅱ형선상관병독재폐지기관상피세포중만기내체적전운가능촉진기전도적활화과정.
