中华神经外科杂志
中華神經外科雜誌
중화신경외과잡지
Chinese Journal of Neurosurgery
2010年
9期
842-846
,共5页
赵剑%滕红林%牛淑琼%张烽%严美娟%沈爱国
趙劍%滕紅林%牛淑瓊%張烽%嚴美娟%瀋愛國
조검%등홍림%우숙경%장봉%엄미연%침애국
β-1,4半乳糖基转移酶%脊髓损伤%聚合酶链反应%荧光抗体技术,间接
β-1,4半乳糖基轉移酶%脊髓損傷%聚閤酶鏈反應%熒光抗體技術,間接
β-1,4반유당기전이매%척수손상%취합매련반응%형광항체기술,간접
β - 1,4 - Galactosyltransferase Ⅴ%Spinal cord injuries%Polymerase chain reaction%Fluorescant antibody technique,indirect
目的 探讨β-1,4半乳糖基转移酶(β-1,4-GalT)在横断性脊髓损伤后的时空表达变化以及细胞定位情况.方法 将42只成年SD大鼠随机分为假手术组和T9横断伤8 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d组,每组6只.采用实时定量PCR测定损伤后各时间段β-1,4-GalT在脊髓中的表达变化;采用原位杂交与免疫荧光标记方法检测β-1,4-GalT在脊髓中的分布以及伤后的定位改变.结果 脊髓横断损伤后,β-1,4-GalT-Ⅴ在损伤上、下段表达高峰分别出现在损伤后8 h和1 d,之后逐渐下降,至伤后14 d降低至假手术组水平.增高的mRNA主要分布于损伤周围的细胞中及脊髓后角浅层的感觉神经元中.荧光原位杂交结果显示,β-1,4-GalT-Ⅴ主要分布于巨噬细胞和小胶质细胞以及病理状态下的少突胶质细胞.同时β-1,4-GalT-Ⅴ mRNA在损伤后大量表达于富含P物质和IB-4的脊髓后角浅层的感觉神经元中.结论 脊髓损伤后β-1,4-GalT在基因和细胞水平呈现明显的时空变化,并且与巨噬细胞和小胶质细胞以及病理状态下的少突胶质细胞存在共定位.该酶可能参与了损伤后的继发性损伤,即伤后早期的炎性反应,并可能与脊髓损伤后的神经病理性疼痛有关.
目的 探討β-1,4半乳糖基轉移酶(β-1,4-GalT)在橫斷性脊髓損傷後的時空錶達變化以及細胞定位情況.方法 將42隻成年SD大鼠隨機分為假手術組和T9橫斷傷8 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d組,每組6隻.採用實時定量PCR測定損傷後各時間段β-1,4-GalT在脊髓中的錶達變化;採用原位雜交與免疫熒光標記方法檢測β-1,4-GalT在脊髓中的分佈以及傷後的定位改變.結果 脊髓橫斷損傷後,β-1,4-GalT-Ⅴ在損傷上、下段錶達高峰分彆齣現在損傷後8 h和1 d,之後逐漸下降,至傷後14 d降低至假手術組水平.增高的mRNA主要分佈于損傷週圍的細胞中及脊髓後角淺層的感覺神經元中.熒光原位雜交結果顯示,β-1,4-GalT-Ⅴ主要分佈于巨噬細胞和小膠質細胞以及病理狀態下的少突膠質細胞.同時β-1,4-GalT-Ⅴ mRNA在損傷後大量錶達于富含P物質和IB-4的脊髓後角淺層的感覺神經元中.結論 脊髓損傷後β-1,4-GalT在基因和細胞水平呈現明顯的時空變化,併且與巨噬細胞和小膠質細胞以及病理狀態下的少突膠質細胞存在共定位.該酶可能參與瞭損傷後的繼髮性損傷,即傷後早期的炎性反應,併可能與脊髓損傷後的神經病理性疼痛有關.
목적 탐토β-1,4반유당기전이매(β-1,4-GalT)재횡단성척수손상후적시공표체변화이급세포정위정황.방법 장42지성년SD대서수궤분위가수술조화T9횡단상8 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d조,매조6지.채용실시정량PCR측정손상후각시간단β-1,4-GalT재척수중적표체변화;채용원위잡교여면역형광표기방법검측β-1,4-GalT재척수중적분포이급상후적정위개변.결과 척수횡단손상후,β-1,4-GalT-Ⅴ재손상상、하단표체고봉분별출현재손상후8 h화1 d,지후축점하강,지상후14 d강저지가수술조수평.증고적mRNA주요분포우손상주위적세포중급척수후각천층적감각신경원중.형광원위잡교결과현시,β-1,4-GalT-Ⅴ주요분포우거서세포화소효질세포이급병리상태하적소돌효질세포.동시β-1,4-GalT-Ⅴ mRNA재손상후대량표체우부함P물질화IB-4적척수후각천층적감각신경원중.결론 척수손상후β-1,4-GalT재기인화세포수평정현명현적시공변화,병차여거서세포화소효질세포이급병리상태하적소돌효질세포존재공정위.해매가능삼여료손상후적계발성손상,즉상후조기적염성반응,병가능여척수손상후적신경병이성동통유관.
Objective To study the gene expression and subcellular localization of β - 1,4 - GalT -Ⅴ after spinal cord injury(SCI). Method Spinal cord transection models were established in adult Sprague Dawley rats. Real - time PCR was used to detect the spatiotemporal expression of β - 1 ,4 - GalT - Ⅴ mRNA after SCI. Also, the changes of β - 1,4 - GalT - Ⅴ localization after injury were investigated by in situ hybridization and immunofluorescence double staining. Results The expression of β - 1,4 - GalT - Ⅴ mRNA increased gradually after SCl,with a peak level at 8 hour to 1 day after injury. β - 1,4 - GalT - Ⅴ - positive cells localized mainly in neurons of gray matter and mostly overlapped with ED - 1 - positive macrophages 1d after SCI, partly colocalized with microglia and oligodendrocytes. Conclusions After SCI in vivo, there is significant variation of β - 1 ,4 - GalT - Ⅴ mRNA. It is dominantly expressed by macrophages, microglia,oligodendrocyte cells and sensory neurons. These results indicate that β - 1,4 - GalT - Ⅴ may participate into the pathophysiologic response after SCI,which provide new insight into further research of mechanism of SCI.
