CAJ | 학술논문

目的探讨艾滋病病毒1型(HIV-1)感染恒河猴外周血单个核细胞(PMBCs),并在其中传代的可能性.方法用HIV-1感染原代猴PBMCs,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定培养0、2、3、7天时上清液中的HIV-1 P24抗原,以观察HIV-1在猴细胞中的复制情况,比较HIV-1分别在人和猴细胞感染的复制动力学.同时采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增HIV-1的env基因,并对其C2-V3区进行序列分析.结果HIV-1毒株SF33、89.6、ⅢB感染猴PBMCs后的第3天,P24抗原达到最高,随着培养时间的延长,P24抗原逐渐降低.将SF33、ⅢB、89.6、YN19四个毒株分别感染猴PBMCs并盲传3代后,P24抗原测定结果均为阴性.提取盲传各代细胞脱氧核糖核酸(DNA)进行PCR扩增,结果显示,SF33、ⅢB、YN19、89.6感染猴细胞的第一代和89.6感染猴细胞的第二代,均可以检测到HIV 1前病毒核酸.比较原毒株env基因C2-V3区的序列发现,传代后的基因序列SF33有5个碱基改变外,其它HIV-1只有0～2个核苷酸改变.与SF33感染猴PBMCs的表现相反,其感染人PBMCs时,HIV-1的复制一直维持在较高的水平.结论应用3个实验株、1个临床分离株HIV-1,虽都能够感染恒河猴外周淋巴细胞,但均难以继代,提示能否用恒河猴作为HIV 1研究的动物模型,尚待进一步的体内外研究.
목적탐토애자병병독1형(HIV-1)감염항하후외주혈단개핵세포(PMBCs),병재기중전대적가능성.방법용HIV-1감염원대후PBMCs,채용매련면역흡부시험(ELISA)방법측정배양0、2、3、7천시상청액중적HIV-1 P24항원,이관찰HIV-1재후세포중적복제정황,비교HIV-1분별재인화후세포감염적복제동역학.동시채용취합매련반응(PCR)방법확증HIV-1적env기인,병대기C2-V3구진행서렬분석.결과HIV-1독주SF33、89.6、ⅢB감염후PBMCs후적제3천,P24항원체도최고,수착배양시간적연장,P24항원축점강저.장SF33、ⅢB、89.6、YN19사개독주분별감염후PBMCs병맹전3대후,P24항원측정결과균위음성.제취맹전각대세포탈양핵당핵산(DNA)진행PCR확증,결과현시,SF33、ⅢB、YN19、89.6감염후세포적제일대화89.6감염후세포적제이대,균가이검측도HIV 1전병독핵산.비교원독주env기인C2-V3구적서렬발현,전대후적기인서렬SF33유5개감기개변외,기타HIV-1지유0～2개핵감산개변.여SF33감염후PBMCs적표현상반,기감염인PBMCs시,HIV-1적복제일직유지재교고적수평.결론응용3개실험주、1개림상분리주HIV-1,수도능구감염항하후외주림파세포,단균난이계대,제시능부용항하후작위HIV 1연구적동물모형,상대진일보적체내외연구.