中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
51期
10025-10027
,共3页
胚胎干细胞%肝细胞%增殖
胚胎榦細胞%肝細胞%增殖
배태간세포%간세포%증식
背景:已证实细胞可以向肝细胞分化.目前的研究集中在诱导分化上,对分化的肝细胞进行分选和进一步扩增研究较少.目的:比较不同的培养体系对胚胎干细胞源性的肝细胞生长的影响.设计:对比观察.材料:ESD-3细胞由上海细胞生物学研究所丛笑倩教授提供.方法:采用半固体培养D3小鼠胚胎下细胞系,形成胚胎体.将来源于18 d的胚胎体用胰酶消化为单个细胞,在胶原处理过的培养皿中贴壁2 h,分别采用Novaslem培养体系、肝细胞培养液培养体系和普通培养体系培养3 d.前2种培养体系又各分为含去除肝脏小鼠血清、含正常小鼠血清和无血清组3组,普通的培养体系分为含正常小鼠血清和含体积分数为0.1的胎牛血清2组.每组细胞均加入20μ g/L肘细胞生长因子、20 μ g/L表皮生长因子.主要观察指标:细胞计数法分析细胞的增殖率,反转录-聚合酶链反应检测自蛋白的表达以及有限稀释聚合酶链反应法半定量检测胚胎源性盯细胞的含量.结果:①胚胎工细胞源性的肘细胞在不同的培养体系中,生长速度和肝细胞的含量不一样,在加有正常小鼠血清的Novastem培养基中,细胞增殖最快,在无血清的Novastem培养体系中,胚胎干细胞源性的肝细胞含量明显增高.②除了DMEM+体积分数为0.1的胎牛血清组未检测到外,其他组均检测到了白蛋白表达.⑨在无血清Novastem培养体系中,肝样细胞含量明显增多.结论:无血清的Novastern培养体系能分选和扩增分化的肝细胞,提高肝细胞纯度.
揹景:已證實細胞可以嚮肝細胞分化.目前的研究集中在誘導分化上,對分化的肝細胞進行分選和進一步擴增研究較少.目的:比較不同的培養體繫對胚胎榦細胞源性的肝細胞生長的影響.設計:對比觀察.材料:ESD-3細胞由上海細胞生物學研究所叢笑倩教授提供.方法:採用半固體培養D3小鼠胚胎下細胞繫,形成胚胎體.將來源于18 d的胚胎體用胰酶消化為單箇細胞,在膠原處理過的培養皿中貼壁2 h,分彆採用Novaslem培養體繫、肝細胞培養液培養體繫和普通培養體繫培養3 d.前2種培養體繫又各分為含去除肝髒小鼠血清、含正常小鼠血清和無血清組3組,普通的培養體繫分為含正常小鼠血清和含體積分數為0.1的胎牛血清2組.每組細胞均加入20μ g/L肘細胞生長因子、20 μ g/L錶皮生長因子.主要觀察指標:細胞計數法分析細胞的增殖率,反轉錄-聚閤酶鏈反應檢測自蛋白的錶達以及有限稀釋聚閤酶鏈反應法半定量檢測胚胎源性盯細胞的含量.結果:①胚胎工細胞源性的肘細胞在不同的培養體繫中,生長速度和肝細胞的含量不一樣,在加有正常小鼠血清的Novastem培養基中,細胞增殖最快,在無血清的Novastem培養體繫中,胚胎榦細胞源性的肝細胞含量明顯增高.②除瞭DMEM+體積分數為0.1的胎牛血清組未檢測到外,其他組均檢測到瞭白蛋白錶達.⑨在無血清Novastem培養體繫中,肝樣細胞含量明顯增多.結論:無血清的Novastern培養體繫能分選和擴增分化的肝細胞,提高肝細胞純度.
배경:이증실세포가이향간세포분화.목전적연구집중재유도분화상,대분화적간세포진행분선화진일보확증연구교소.목적:비교불동적배양체계대배태간세포원성적간세포생장적영향.설계:대비관찰.재료:ESD-3세포유상해세포생물학연구소총소천교수제공.방법:채용반고체배양D3소서배태하세포계,형성배태체.장래원우18 d적배태체용이매소화위단개세포,재효원처리과적배양명중첩벽2 h,분별채용Novaslem배양체계、간세포배양액배양체계화보통배양체계배양3 d.전2충배양체계우각분위함거제간장소서혈청、함정상소서혈청화무혈청조3조,보통적배양체계분위함정상소서혈청화함체적분수위0.1적태우혈청2조.매조세포균가입20μ g/L주세포생장인자、20 μ g/L표피생장인자.주요관찰지표:세포계수법분석세포적증식솔,반전록-취합매련반응검측자단백적표체이급유한희석취합매련반응법반정량검측배태원성정세포적함량.결과:①배태공세포원성적주세포재불동적배양체계중,생장속도화간세포적함량불일양,재가유정상소서혈청적Novastem배양기중,세포증식최쾌,재무혈청적Novastem배양체계중,배태간세포원성적간세포함량명현증고.②제료DMEM+체적분수위0.1적태우혈청조미검측도외,기타조균검측도료백단백표체.⑨재무혈청Novastem배양체계중,간양세포함량명현증다.결론:무혈청적Novastern배양체계능분선화확증분화적간세포,제고간세포순도.
