医学临床研究
醫學臨床研究
의학림상연구
JOURNAL OF CLINICAL RESEARCH
2009年
3期
386-389
,共4页
卓文利%付云烽%徐廷昭%吴卫真%杨顺良%谭建明
卓文利%付雲烽%徐廷昭%吳衛真%楊順良%譚建明
탁문리%부운봉%서정소%오위진%양순량%담건명
干细胞%骨髓细胞/细胞学%大鼠
榦細胞%骨髓細胞/細胞學%大鼠
간세포%골수세포/세포학%대서
[目的]探讨大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)体外分离、培养和纯化方法,鉴定其生物学特性,为BMSCs应用奠定技术基础.[方法]采用密度梯度离心法结合贴壁分离法分离培养纯化SD大鼠BMSCs,观察其形态,测定细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞表面标记,成骨诱导试剂盒检测rBMSCs向成骨细胞分化的潜能.[结果]显微镜下rBMSCs呈梭形、多角形成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长.生长曲线分析rBMSCs贴壁2 d基本无增殖,处于潜伏期,对数增殖期为3～7 d,d8后进入平台期,细胞出现接触抑制现象.rBMSCs表面标志显示第3代rBMSCs纯度可达97%以上,CD44、CD90呈阳性表达,CD34呈阴性表达;向成骨诱导rBMSCs 10 d后细胞表现成骨细胞特性,碱性磷酸酶活性明显升高.[结论]本实验建立了一种理想的体外分离扩增纯化rBMSCs的培养体系.实验结果表明所分离培养的rBMSCs纯度高、生物学特征稳定,适用于对BMSCs进一步的应用研究.
[目的]探討大鼠骨髓間充質榦細胞(rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)體外分離、培養和純化方法,鑒定其生物學特性,為BMSCs應用奠定技術基礎.[方法]採用密度梯度離心法結閤貼壁分離法分離培養純化SD大鼠BMSCs,觀察其形態,測定細胞生長麯線,流式細胞儀檢測細胞錶麵標記,成骨誘導試劑盒檢測rBMSCs嚮成骨細胞分化的潛能.[結果]顯微鏡下rBMSCs呈梭形、多角形成纖維細胞樣形態,大小均一,漩渦狀生長.生長麯線分析rBMSCs貼壁2 d基本無增殖,處于潛伏期,對數增殖期為3～7 d,d8後進入平檯期,細胞齣現接觸抑製現象.rBMSCs錶麵標誌顯示第3代rBMSCs純度可達97%以上,CD44、CD90呈暘性錶達,CD34呈陰性錶達;嚮成骨誘導rBMSCs 10 d後細胞錶現成骨細胞特性,堿性燐痠酶活性明顯升高.[結論]本實驗建立瞭一種理想的體外分離擴增純化rBMSCs的培養體繫.實驗結果錶明所分離培養的rBMSCs純度高、生物學特徵穩定,適用于對BMSCs進一步的應用研究.
[목적]탐토대서골수간충질간세포(rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)체외분리、배양화순화방법,감정기생물학특성,위BMSCs응용전정기술기출.[방법]채용밀도제도리심법결합첩벽분리법분리배양순화SD대서BMSCs,관찰기형태,측정세포생장곡선,류식세포의검측세포표면표기,성골유도시제합검측rBMSCs향성골세포분화적잠능.[결과]현미경하rBMSCs정사형、다각형성섬유세포양형태,대소균일,선와상생장.생장곡선분석rBMSCs첩벽2 d기본무증식,처우잠복기,대수증식기위3～7 d,d8후진입평태기,세포출현접촉억제현상.rBMSCs표면표지현시제3대rBMSCs순도가체97%이상,CD44、CD90정양성표체,CD34정음성표체;향성골유도rBMSCs 10 d후세포표현성골세포특성,감성린산매활성명현승고.[결론]본실험건립료일충이상적체외분리확증순화rBMSCs적배양체계.실험결과표명소분리배양적rBMSCs순도고、생물학특정은정,괄용우대BMSCs진일보적응용연구.
