中国食品学报
中國食品學報
중국식품학보
JOURNAL OF CHINESE INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2010年
1期
10-18
,共9页
韩璞%田洪涛%苑社强%郭红敏%郭兴华%罗云波
韓璞%田洪濤%苑社彊%郭紅敏%郭興華%囉雲波
한박%전홍도%원사강%곽홍민%곽흥화%라운파
罗伊氏乳杆菌%原生质体%制备%再生
囉伊氏乳桿菌%原生質體%製備%再生
라이씨유간균%원생질체%제비%재생
研究细胞培养和溶菌酶酶解条件对罗伊氏乳杆菌原生质体形成率的影响以及罗伊氏乳杆菌原生质体在多种再生培养基中的再生条件,结果表明罗伊氏乳杆菌05-1和05-2原生质体形成的最适条件:在MRS培养基中接种量5%(两菌株活菌数分别为4.96×108cfu/mL和8.04×107cfu/mL),37℃静置培养至OD60值1.0(两菌株活菌数分别为2.36×1012cfu/mL和6.56×109cfu/mL)左右,酶解pH8.0、酶质量浓度20 mg/mL、酶解时间45min.在此最适条件下,两菌株原生质体形成率分别为90.2%和92.8%;在最适再生培养基RM1中,罗伊氏乳杆菌05-1和05-2原生质体的再生率分别为30.6%和23.2%;RM1中,胎牛血清(BSA)是罗伊氏乳杆菌原生质体再生不可获缺的物质.本研究为构建益生乳杆菌食品级基因克隆和表达系统,实现原生质体的转化及细胞融合育种与基因组洗牌分子育种,提供理论依据.
研究細胞培養和溶菌酶酶解條件對囉伊氏乳桿菌原生質體形成率的影響以及囉伊氏乳桿菌原生質體在多種再生培養基中的再生條件,結果錶明囉伊氏乳桿菌05-1和05-2原生質體形成的最適條件:在MRS培養基中接種量5%(兩菌株活菌數分彆為4.96×108cfu/mL和8.04×107cfu/mL),37℃靜置培養至OD60值1.0(兩菌株活菌數分彆為2.36×1012cfu/mL和6.56×109cfu/mL)左右,酶解pH8.0、酶質量濃度20 mg/mL、酶解時間45min.在此最適條件下,兩菌株原生質體形成率分彆為90.2%和92.8%;在最適再生培養基RM1中,囉伊氏乳桿菌05-1和05-2原生質體的再生率分彆為30.6%和23.2%;RM1中,胎牛血清(BSA)是囉伊氏乳桿菌原生質體再生不可穫缺的物質.本研究為構建益生乳桿菌食品級基因剋隆和錶達繫統,實現原生質體的轉化及細胞融閤育種與基因組洗牌分子育種,提供理論依據.
연구세포배양화용균매매해조건대라이씨유간균원생질체형성솔적영향이급라이씨유간균원생질체재다충재생배양기중적재생조건,결과표명라이씨유간균05-1화05-2원생질체형성적최괄조건:재MRS배양기중접충량5%(량균주활균수분별위4.96×108cfu/mL화8.04×107cfu/mL),37℃정치배양지OD60치1.0(량균주활균수분별위2.36×1012cfu/mL화6.56×109cfu/mL)좌우,매해pH8.0、매질량농도20 mg/mL、매해시간45min.재차최괄조건하,량균주원생질체형성솔분별위90.2%화92.8%;재최괄재생배양기RM1중,라이씨유간균05-1화05-2원생질체적재생솔분별위30.6%화23.2%;RM1중,태우혈청(BSA)시라이씨유간균원생질체재생불가획결적물질.본연구위구건익생유간균식품급기인극륭화표체계통,실현원생질체적전화급세포융합육충여기인조세패분자육충,제공이론의거.