福建农林大学学报（自然科学版）
福建農林大學學報（自然科學版）
복건농림대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2010年
5期
502-506
,共5页
邱爱连%蔡汉阳%刘林林%朱万里%赖燕%何水林%张健
邱愛連%蔡漢暘%劉林林%硃萬裏%賴燕%何水林%張健
구애련%채한양%류림림%주만리%뢰연%하수림%장건
辣椒%ROP%鸟苷酸交换因子(GEF)%酵母双杂交
辣椒%ROP%鳥苷痠交換因子(GEF)%酵母雙雜交
랄초%ROP%조감산교환인자(GEF)%효모쌍잡교
ROP是植物特有的一类Rho相关GTPases,在植物体内通过GTP结合形式与GDP结合形式的切换而对生长发育和适应环境起调节作用.由GTP结合形式向GDP结合形式的转换主要依赖于鸟苷酸交换因子(guanine nucleotide exchange factor, GEF).本文以锁定于GDP结合形式的辣椒DN-CaROP1突变体为诱饵,采用ProQuestTM酵母双杂交体系,从辣椒幼苗cDNA文库中分离了辣椒GEF阳性克隆,其推导的氨基酸序列与其他植物中发现的GEF具有较高的同源性,并含典型的植物ROPGEF保守域DUF315及N端与C端的高度变化域,将之命名为CaROPGEF1;RT-PCR分析表明,CaROPGEF1在辣椒多种组织中均有表达;进一步酵母双杂交分析表明,CaROPGEF1可与GDP结合态的ROP结合,而不能与GTP结合态的ROP结合.上述结果暗示CaROPGEF1调节的ROP从DN态向CA态的转化在辣椒植株中频繁发生,可能参与辣椒ROP介导的生长、发育和对环境适应的调控.
ROP是植物特有的一類Rho相關GTPases,在植物體內通過GTP結閤形式與GDP結閤形式的切換而對生長髮育和適應環境起調節作用.由GTP結閤形式嚮GDP結閤形式的轉換主要依賴于鳥苷痠交換因子(guanine nucleotide exchange factor, GEF).本文以鎖定于GDP結閤形式的辣椒DN-CaROP1突變體為誘餌,採用ProQuestTM酵母雙雜交體繫,從辣椒幼苗cDNA文庫中分離瞭辣椒GEF暘性剋隆,其推導的氨基痠序列與其他植物中髮現的GEF具有較高的同源性,併含典型的植物ROPGEF保守域DUF315及N耑與C耑的高度變化域,將之命名為CaROPGEF1;RT-PCR分析錶明,CaROPGEF1在辣椒多種組織中均有錶達;進一步酵母雙雜交分析錶明,CaROPGEF1可與GDP結閤態的ROP結閤,而不能與GTP結閤態的ROP結閤.上述結果暗示CaROPGEF1調節的ROP從DN態嚮CA態的轉化在辣椒植株中頻繁髮生,可能參與辣椒ROP介導的生長、髮育和對環境適應的調控.
ROP시식물특유적일류Rho상관GTPases,재식물체내통과GTP결합형식여GDP결합형식적절환이대생장발육화괄응배경기조절작용.유GTP결합형식향GDP결합형식적전환주요의뢰우조감산교환인자(guanine nucleotide exchange factor, GEF).본문이쇄정우GDP결합형식적랄초DN-CaROP1돌변체위유이,채용ProQuestTM효모쌍잡교체계,종랄초유묘cDNA문고중분리료랄초GEF양성극륭,기추도적안기산서렬여기타식물중발현적GEF구유교고적동원성,병함전형적식물ROPGEF보수역DUF315급N단여C단적고도변화역,장지명명위CaROPGEF1;RT-PCR분석표명,CaROPGEF1재랄초다충조직중균유표체;진일보효모쌍잡교분석표명,CaROPGEF1가여GDP결합태적ROP결합,이불능여GTP결합태적ROP결합.상술결과암시CaROPGEF1조절적ROP종DN태향CA태적전화재랄초식주중빈번발생,가능삼여랄초ROP개도적생장、발육화대배경괄응적조공.
