生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2011年
5期
13-16
,共4页
棉铃虫核多角体病毒%iap基因%原核表达%抗体%表达时相
棉鈴蟲覈多角體病毒%iap基因%原覈錶達%抗體%錶達時相
면령충핵다각체병독%iap기인%원핵표체%항체%표체시상
目的:原核表达棉铃虫核多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HearNPV)iap3基因,制备该蛋白的多克隆抗体,并利用该抗体分析iap3基因在病毒感染过程的表达时相,为深入研究提供基础.方法:PCR扩增iap3基因后,克隆至pET28b,转化到大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达,利用亲合层析进行蛋白纯化,将纯化融合蛋白免疫大鼠制备抗血清,利用抗血清Western blot检测IAP3在病毒感染过程的表达时相.结果:成功在原核细胞中表达iap3基因,并获得纯化的融合His - tag的IAP3蛋白,制备了该蛋白的多克隆抗体.发现iap3基因最早在感染后24h表达,到72h到达表达高峰.结论:获得了IAP3多克隆抗体,iaP3基因是一个晚期表达基因.
目的:原覈錶達棉鈴蟲覈多角體病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HearNPV)iap3基因,製備該蛋白的多剋隆抗體,併利用該抗體分析iap3基因在病毒感染過程的錶達時相,為深入研究提供基礎.方法:PCR擴增iap3基因後,剋隆至pET28b,轉化到大腸桿菌BL21 (DE3)中誘導錶達,利用親閤層析進行蛋白純化,將純化融閤蛋白免疫大鼠製備抗血清,利用抗血清Western blot檢測IAP3在病毒感染過程的錶達時相.結果:成功在原覈細胞中錶達iap3基因,併穫得純化的融閤His - tag的IAP3蛋白,製備瞭該蛋白的多剋隆抗體.髮現iap3基因最早在感染後24h錶達,到72h到達錶達高峰.結論:穫得瞭IAP3多剋隆抗體,iaP3基因是一箇晚期錶達基因.
목적:원핵표체면령충핵다각체병독(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HearNPV)iap3기인,제비해단백적다극륭항체,병이용해항체분석iap3기인재병독감염과정적표체시상,위심입연구제공기출.방법:PCR확증iap3기인후,극륭지pET28b,전화도대장간균BL21 (DE3)중유도표체,이용친합층석진행단백순화,장순화융합단백면역대서제비항혈청,이용항혈청Western blot검측IAP3재병독감염과정적표체시상.결과:성공재원핵세포중표체iap3기인,병획득순화적융합His - tag적IAP3단백,제비료해단백적다극륭항체.발현iap3기인최조재감염후24h표체,도72h도체표체고봉.결론:획득료IAP3다극륭항체,iaP3기인시일개만기표체기인.
