激光生物学报
激光生物學報
격광생물학보
ACTA LASER BIOLOGY SINICA
2012年
1期
52-55
,共4页
刘腾%徐腊梅%江志钢%袁婺洲%吴秀山
劉騰%徐臘梅%江誌鋼%袁婺洲%吳秀山
류등%서석매%강지강%원무주%오수산
Hand%果蝇%原核表达
Hand%果蠅%原覈錶達
Hand%과승%원핵표체
制备果蝇心脏标记基因Hand抗体对研究果蝇心脏发育具有重要意义.从果蝇体内提取出总RNA,反转录得到果蝇的cDNA,将其作为模板PCR得到Hand基因部分片段,将片段连接到pET-28a上,构建重组质粒pET-28a-Hand,将重组质粒转化rosetta受体菌,IPTG诱导表达,表达产物经镍柱纯化,SDS-PAGE电泳分析,结果表明Hand基因在大肠杆菌中成功表达,表达的Hand融合蛋白分子量大约为24 kD,经镍柱纯化后获得了高纯度可溶性的Hand蛋白.
製備果蠅心髒標記基因Hand抗體對研究果蠅心髒髮育具有重要意義.從果蠅體內提取齣總RNA,反轉錄得到果蠅的cDNA,將其作為模闆PCR得到Hand基因部分片段,將片段連接到pET-28a上,構建重組質粒pET-28a-Hand,將重組質粒轉化rosetta受體菌,IPTG誘導錶達,錶達產物經鎳柱純化,SDS-PAGE電泳分析,結果錶明Hand基因在大腸桿菌中成功錶達,錶達的Hand融閤蛋白分子量大約為24 kD,經鎳柱純化後穫得瞭高純度可溶性的Hand蛋白.
제비과승심장표기기인Hand항체대연구과승심장발육구유중요의의.종과승체내제취출총RNA,반전록득도과승적cDNA,장기작위모판PCR득도Hand기인부분편단,장편단련접도pET-28a상,구건중조질립pET-28a-Hand,장중조질립전화rosetta수체균,IPTG유도표체,표체산물경얼주순화,SDS-PAGE전영분석,결과표명Hand기인재대장간균중성공표체,표체적Hand융합단백분자량대약위24 kD,경얼주순화후획득료고순도가용성적Hand단백.
