小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达
소반추수역병독H당단백기인원핵표체재체적구건급표체
Construction of prokaryotic vector and expression of H glycoprotein gene of peste des petits ruminants virus
  • 万方数据
    中国兽医科学 중국수의과학
    VETERINARY SCIENCE IN CHINA
    2006年 9期 692-695 ,共4页

    刘玉洪%花群义%徐自忠%杨云庆%周晓黎%董俊%尹尚莲%许靖逸%高洪

    류옥홍%화군의%서자충%양운경%주효려%동준%윤상련%허정일%고홍

    小反刍兽疫病毒%H糖蛋白基因%表达 小反芻獸疫病毒%H糖蛋白基因%錶達
    소반추수역병독%H당단백기인%표체
    参照GenBank中小反刍兽疫病毒(PPRV)H抗原基因序列,人工合成了PPRV H基因,将其克隆至pUC18-T质粒中,转化E.coli JM109感受态细胞,构建并选择PPRV H基因克隆重组质粒,经核苷酸序列分析正确,将其克隆至pBAD/Thio-TOPO载体中,转化E.coli TOP10感受态细胞,核苷酸序列分析证实,成功构建了PPRV H基因重组表达载体.经不同浓度L-阿拉伯糖诱导,可稳定、高效地表达PPRV H抗原.SDS-PAGE分析结果表明,用终浓度为0.2 g/L的L-阿拉伯糖诱导5 h的表达量最高,表达蛋白为分子质量约83 ku的融合蛋白;经薄层扫描分析,其表达产量约占茵体总蛋白的10%.Western-blotting检测表明,诱导的蛋白能与PPRV H蛋白单抗发生特异性反应,说明表达的融合蛋白中含有PPRV H糖蛋白抗原.
    삼조GenBank중소반추수역병독(PPRV)H항원기인서렬,인공합성료PPRV H기인,장기극륭지pUC18-T질립중,전화E.coli JM109감수태세포,구건병선택PPRV H기인극륭중조질립,경핵감산서렬분석정학,장기극륭지pBAD/Thio-TOPO재체중,전화E.coli TOP10감수태세포,핵감산서렬분석증실,성공구건료PPRV H기인중조표체재체.경불동농도L-아랍백당유도,가은정、고효지표체PPRV H항원.SDS-PAGE분석결과표명,용종농도위0.2 g/L적L-아랍백당유도5 h적표체량최고,표체단백위분자질량약83 ku적융합단백;경박층소묘분석,기표체산량약점인체총단백적10%.Western-blotting검측표명,유도적단백능여PPRV H단백단항발생특이성반응,설명표체적융합단백중함유PPRV H당단백항원.
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