神经解剖学杂志
神經解剖學雜誌
신경해부학잡지
CHINESE JOURNAL OF NEUROANATOMY
2008年
1期
48-52
,共5页
吕立夏%李学礼%谷辉杰%郑莉%李静琪%徐磊
呂立夏%李學禮%穀輝傑%鄭莉%李靜琪%徐磊
려립하%리학례%곡휘걸%정리%리정기%서뢰
酵母双杂交%STCH%人脑
酵母雙雜交%STCH%人腦
효모쌍잡교%STCH%인뇌
以人应激和分子伴侣蛋白(STCH)为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术在高严格条件下筛选人脑cDNA文库.在SD/-4培养基上共获得156个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,潜在的与STCH相互作用的蛋白有:VDAC、MBP2、ZNF251、RanBP9、Phosophate glycolase、β-tubulin、up1、up2和WW adaptor蛋白.基于各候选蛋白与神经系统疾病的关系,选择RanBP9作进一步验证实验.经体外GST-Pulldown和体内免疫共沉淀实验证实RanBP9和STCH能够相互作用,明确RanBP9的羧基端为相互作用的最小功能域.此结果为我们进一步揭示STCH作用的分子机制提供了线索.
以人應激和分子伴侶蛋白(STCH)為誘餌蛋白,利用酵母雙雜交技術在高嚴格條件下篩選人腦cDNA文庫.在SD/-4培養基上共穫得156箇暘性剋隆,將酵母菌擴增後抽提質粒,轉化大腸桿菌,進行序列分析,併經過迴複雜交驗證,潛在的與STCH相互作用的蛋白有:VDAC、MBP2、ZNF251、RanBP9、Phosophate glycolase、β-tubulin、up1、up2和WW adaptor蛋白.基于各候選蛋白與神經繫統疾病的關繫,選擇RanBP9作進一步驗證實驗.經體外GST-Pulldown和體內免疫共沉澱實驗證實RanBP9和STCH能夠相互作用,明確RanBP9的羧基耑為相互作用的最小功能域.此結果為我們進一步揭示STCH作用的分子機製提供瞭線索.
이인응격화분자반려단백(STCH)위유이단백,이용효모쌍잡교기술재고엄격조건하사선인뇌cDNA문고.재SD/-4배양기상공획득156개양성극륭,장효모균확증후추제질립,전화대장간균,진행서렬분석,병경과회복잡교험증,잠재적여STCH상호작용적단백유:VDAC、MBP2、ZNF251、RanBP9、Phosophate glycolase、β-tubulin、up1、up2화WW adaptor단백.기우각후선단백여신경계통질병적관계,선택RanBP9작진일보험증실험.경체외GST-Pulldown화체내면역공침정실험증실RanBP9화STCH능구상호작용,명학RanBP9적최기단위상호작용적최소공능역.차결과위아문진일보게시STCH작용적분자궤제제공료선색.
