中华临床免疫和变态反应杂志
中華臨床免疫和變態反應雜誌
중화림상면역화변태반응잡지
CHINESE JOURNAL OF ALLERGY & CLINICAL IMMUNOLOGY
2009年
1期
16-20
,共5页
黄慈波%程永静%王芳%高洁%牛素平%赵籥陶
黃慈波%程永靜%王芳%高潔%牛素平%趙籥陶
황자파%정영정%왕방%고길%우소평%조약도
原发性干燥综合征%基因芯片%外周血单个核细胞
原髮性榦燥綜閤徵%基因芯片%外週血單箇覈細胞
원발성간조종합정%기인심편%외주혈단개핵세포
目的 为探讨原发性干燥综合征的发病机制,应用cDNA基因芯片技术分析原发性干燥综合征患者外周血单个核细胞的免疫细胞及信号相关差异表达基因.方法 Ficoll密度梯度离心法分离3例初发原发性干燥综合征患者及同年龄正常对照者外周血单个核细胞,Trizol一步法提取mRNA,反转录至cDNA,分别用Cy5及Cy3荧光标记cDNA,与寡核苷酸片段进行杂交,采用GenePix Pro 3.0图像分析软件把图像信号转化为数字信号,计算Cy5和Cy3两种荧光信号比率(ratio).将有3个以上重复ratio的基因输入SAM系统,分析有统计学意义的免疫细胞及信号相关差异表达基因及其疾病通路(pathway).结果 原发性干燥综合征患者与正常对照者外周血单个核细胞以自然杀伤细胞介导的细胞毒通路(CD244、FASLG、CD247、GZMB、KLRD1、ICAM1)、B细胞受体信号通路(CD79A、CD19、BLNK、CD72)、细胞凋亡通路(FASLG、PRKAR2B、FADD)中的免疫细胞相关通路及基因差异最为显著(P＜0.05),以上通路中有5个表达基因上调,7个表达基因下调.结论 原发性干燥综合征患者的免疫细胞及信号相关通路有较多的差异表达基因,这些基因的筛选和进一步验证将为该病的发病机制及诊治提供新的思路.
目的 為探討原髮性榦燥綜閤徵的髮病機製,應用cDNA基因芯片技術分析原髮性榦燥綜閤徵患者外週血單箇覈細胞的免疫細胞及信號相關差異錶達基因.方法 Ficoll密度梯度離心法分離3例初髮原髮性榦燥綜閤徵患者及同年齡正常對照者外週血單箇覈細胞,Trizol一步法提取mRNA,反轉錄至cDNA,分彆用Cy5及Cy3熒光標記cDNA,與寡覈苷痠片段進行雜交,採用GenePix Pro 3.0圖像分析軟件把圖像信號轉化為數字信號,計算Cy5和Cy3兩種熒光信號比率(ratio).將有3箇以上重複ratio的基因輸入SAM繫統,分析有統計學意義的免疫細胞及信號相關差異錶達基因及其疾病通路(pathway).結果 原髮性榦燥綜閤徵患者與正常對照者外週血單箇覈細胞以自然殺傷細胞介導的細胞毒通路(CD244、FASLG、CD247、GZMB、KLRD1、ICAM1)、B細胞受體信號通路(CD79A、CD19、BLNK、CD72)、細胞凋亡通路(FASLG、PRKAR2B、FADD)中的免疫細胞相關通路及基因差異最為顯著(P＜0.05),以上通路中有5箇錶達基因上調,7箇錶達基因下調.結論 原髮性榦燥綜閤徵患者的免疫細胞及信號相關通路有較多的差異錶達基因,這些基因的篩選和進一步驗證將為該病的髮病機製及診治提供新的思路.
목적 위탐토원발성간조종합정적발병궤제,응용cDNA기인심편기술분석원발성간조종합정환자외주혈단개핵세포적면역세포급신호상관차이표체기인.방법 Ficoll밀도제도리심법분리3례초발원발성간조종합정환자급동년령정상대조자외주혈단개핵세포,Trizol일보법제취mRNA,반전록지cDNA,분별용Cy5급Cy3형광표기cDNA,여과핵감산편단진행잡교,채용GenePix Pro 3.0도상분석연건파도상신호전화위수자신호,계산Cy5화Cy3량충형광신호비솔(ratio).장유3개이상중복ratio적기인수입SAM계통,분석유통계학의의적면역세포급신호상관차이표체기인급기질병통로(pathway).결과 원발성간조종합정환자여정상대조자외주혈단개핵세포이자연살상세포개도적세포독통로(CD244、FASLG、CD247、GZMB、KLRD1、ICAM1)、B세포수체신호통로(CD79A、CD19、BLNK、CD72)、세포조망통로(FASLG、PRKAR2B、FADD)중적면역세포상관통로급기인차이최위현저(P＜0.05),이상통로중유5개표체기인상조,7개표체기인하조.결론 원발성간조종합정환자적면역세포급신호상관통로유교다적차이표체기인,저사기인적사선화진일보험증장위해병적발병궤제급진치제공신적사로.
