CAJ | 학술논문

背景:人脐带Wharton's Jelly源间充质干细胞避免了伦理的限制,来源丰富,可以作为种子细胞进行组织修复.目的:观察体外诱导脐带Wharton's Jelly中间充质干细胞向许旺细胞分化的可行性.方法:分离、培养脐带Wharton's Jelly中间充质干细胞,流式细胞术鉴定细胞表面标志.利用神经细胞培养基、碱性成纤维生长因子、表皮生长因子、维甲酸、血小板源性生长因子等采用两步法将脐带间充质干细胞诱导分化为许旺细胞,倒置显微镜下观察细胞形态变化.利用免疫细胞化学染色法检测巢蛋白、S-100、纤维酸性蛋白的表达,反转录-聚合酶链反应、免疫印记技术检测许旺细胞特异性蛋白产物表达.结果与结论:脐带细胞培养第7天形态发生变化,部分细胞变成梭形.原代细胞培养10 d左右可达80%～90%融合,细胞呈梭形.分离培养的细胞表达具有间充质干细胞表面特有标志:CD44(91.4%),CD29(91.3%),CD105(99.2%),不表达CD34(0.2%),CD45(0.9%),CD14(0.6%).脐带Wharton's Jelly中间充质干细胞经第一阶段诱导后,细胞由短梭形变成长梭形或纺锤形,并出现聚集现象,由形状规则、表面圆滑的球形细胞团形成.第二阶段诱导后,有长梭形细胞从球形细胞团爬出,96 h后细胞形态多为长梭形,伴有多极现象.免疫细胞化学染色结果示:长梭形多极细胞具有许旺细胞特异的纤维酸性蛋白、S100蛋白染色.结果表明脐带Wharton's Jelly中间充质干细胞可在体外诱导分化为许旺细胞.
배경:인제대Wharton's Jelly원간충질간세포피면료윤리적한제,래원봉부,가이작위충자세포진행조직수복.목적:관찰체외유도제대Wharton's Jelly중간충질간세포향허왕세포분화적가행성.방법:분리、배양제대Wharton's Jelly중간충질간세포,류식세포술감정세포표면표지.이용신경세포배양기、감성성섬유생장인자、표피생장인자、유갑산、혈소판원성생장인자등채용량보법장제대간충질간세포유도분화위허왕세포,도치현미경하관찰세포형태변화.이용면역세포화학염색법검측소단백、S-100、섬유산성단백적표체,반전록-취합매련반응、면역인기기술검측허왕세포특이성단백산물표체.결과여결론:제대세포배양제7천형태발생변화,부분세포변성사형.원대세포배양10 d좌우가체80%～90%융합,세포정사형.분리배양적세포표체구유간충질간세포표면특유표지:CD44(91.4%),CD29(91.3%),CD105(99.2%),불표체CD34(0.2%),CD45(0.9%),CD14(0.6%).제대Wharton's Jelly중간충질간세포경제일계단유도후,세포유단사형변성장사형혹방추형,병출현취집현상,유형상규칙、표면원활적구형세포단형성.제이계단유도후,유장사형세포종구형세포단파출,96 h후세포형태다위장사형,반유다겁현상.면역세포화학염색결과시:장사형다겁세포구유허왕세포특이적섬유산성단백、S100단백염색.결과표명제대Wharton's Jelly중간충질간세포가재체외유도분화위허왕세포.